发明名称 一种同位素茎秆双标记示踪方法
摘要 本发明属于同位素示踪方法技术领域,特别涉及一种同位素茎秆双标记示踪方法。为解决原有标记方法在N、C同时追踪方面的局限,对植物扰动较大,影响植物根系沉积物质的自然分泌,同位素回收率低,以及研究结果不稳定等问题,本发明提供了一种同位素茎秆双标记示踪方法。本发明方法包括以下步骤:(1)材料的准备;(2)进行标记;(3)取样与测定;(4)计算。本发明方法可以在土壤栽培条件下进行原位标记,不需扰乱根系的空间分布,保持土壤与根的联系,且可以用含<sup>13</sup>C的葡萄糖和<sup>15</sup>N的尿素混合溶液进行碳氮双标记。与其他方法相比,应用这种方法实现了对植物材料比较均匀的标记及<sup>15</sup>N和<sup>13</sup>C的高回收率。
申请公布号 CN104142382B 申请公布日期 2016.02.17
申请号 CN201410342182.0 申请日期 2014.07.17
申请人 中国农业大学 发明人 曾昭海;臧华栋;胡跃高;杨学超;陈恭
分类号 G01N33/00(2006.01)I 主分类号 G01N33/00(2006.01)I
代理机构 北京众合诚成知识产权代理有限公司 11246 代理人 黄家俊
主权项 一种同位素茎秆双标记示踪方法,其特征在于,该方法步骤如下:(1)材料的准备;(2)进行标记;(3)取样与测定;(4)计算;所述步骤(1)中准备的材料如下:气相色谱瓶、脱脂棉线、缝衣针、穿针器、铜丝、塑料管、丰度为99%的<sup>15</sup>N‑尿素、丰度为99%的<sup>13</sup>C‑葡萄糖,体积分数为75%的酒精水溶液、棉球、镊子、喷壶、U型铁丝;所述步骤(2)中进行标记的方法如下:在植物的营养生长末期进行标记,在植株待标记部位钻孔,用脱脂棉线穿过此孔,将脱脂棉线的两端插入装有标记溶液的试剂瓶中;所述脱脂棉线外套有塑料管,以防止标记溶液的损失;用铜丝固定脱脂棉线、塑料管和植株之间不错位,并且固定牢固,防止间隙太大造成溶液蒸腾损失;所述标记溶液为配制好的丰度为99%的<sup>13</sup>C‑葡萄糖和丰度为99%的<sup>15</sup>N‑尿素混合溶液,标记2次,中间间隔1周时间,每次加入1mL的标记溶液,吸收完毕后,再加入1mL~2mL的去离子水,以使脱脂棉线上残留的溶液全部被植物吸收;在全部标记过程完成后,将标记用的材料及装置从植物上取下,收集保存。
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