一种通过体胚培养获得大量小蓬竹再生植株的方法

摘要

本发明公开了一种通过体胚培养获得大量小蓬竹再生植株的方法，包括采用小蓬竹无菌苗茎段为外植体，在诱导培养基上形成愈伤组织，进而诱导胚性愈伤组织的发生，将胚性愈伤组织接种到改良的分化培养基上，诱导胚性愈伤组织分化出芽，再接种到生根培养基上分化出根，形成完整植株，最后移栽到花盆，完成小蓬竹再生全过程。本发明方法，获得小蓬竹的频率高，时间短，非常适宜于小蓬竹遗传改良。完成小蓬竹植株再生的时间最快仅需12周左右。为小蓬竹的快速繁殖和定向生物技术育种奠定了坚实的基础。

主权项

一种通过体胚培养获得大量小蓬竹再生植株的方法，其特征在于，具体步骤为：1）将无菌的小蓬竹丛芽分段接种到愈伤诱导培养基进行愈伤诱导，愈伤组织形成后转接到继代培养基进行增殖培养，得到胚性愈伤组织；愈伤诱导培养基组成为：以MS为基本培养基，再附加2.0~3.0 mg/L 2,4‑D、0.01~0.1 mg /L TDZ、0.5~1.0 mg/LNAA、100 mg/L Vc、30 g/L蔗糖、6.5 g/L琼脂；继代培养基组成为：以MS为基本培养基，再附加4.0~5 .0 mg/L 2,4‑D、0.5~1.0 mg /L TDZ、100 mg/L Vc、30 g/L蔗糖、7 g/L琼脂；2）将胚性愈伤组织转接到分化培养基上培养，至有再生丛芽分化形成；分化培养基组成为：以MS为基本培养基，再附加1.0~2.0 mg/L TDZ、0.5~1.0 mg/L NAA、30 g/L蔗糖、6.5 g/L琼脂；3）将已经分化出的再生芽转接到生根培养基中，进行生根培养；生根培养基组成为以MS为基本培养基，再附加1.0~3.0 mg/L NAA，0.1~0.5 mg/ L IBA；4）待根生长至5~10 cm时，进行再生苗的移栽；再生苗移栽花盆中后置于植物生长室中生长2周后移至室外。