一种千日红再生植株的诱导方法

摘要

本发明公开了一种千日红再生植株的诱导方法，包括无菌实生苗培育、接种、愈伤组织诱导、愈伤组织增殖、再生芽诱导、再生根诱导、炼苗、移植等步骤。以千日红无菌实生苗的下胚轴作为外植体，不但可以成功的诱导出愈伤组织，并且，愈伤组织可以分化成再生苗，并进一步分化可以形成根从而形成完整的植株；愈伤组织可以继续不断的增殖，不用再耗用千日红外植体即可继续源源不断的为千日红提供丰富的种质资源。

主权项

一种千日红再生植株的诱导方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)无菌实生苗培育：千日红种子清洗干净后，于体积浓度为75%的酒精消毒30s，再用体积浓度为3%的次氯酸钠消毒5min，无菌水冲洗3～5次后，接种到无菌苗培养基上；所述无菌苗培养基以MS培养基为基础培养基，1L培养基中添加蔗糖30g、琼脂6g、NAA 3mg；(2)接种：将实生苗从培养基中取出，无菌水冲洗干净后，以无菌实生苗的下胚轴作为外植体，将下胚轴切成长度为0.2~0.5cm的切段，将切段接种于愈伤组织诱导培养基上；(3)愈伤组织诱导：培养条件为全黑暗培养、温度20~22℃，培养4‑6周至愈伤组织形成；(4)愈伤组织增殖：将步骤3中获得愈伤组织转移到增殖培养基中培养，培养条件为光强1000~2000Lx、光照时间12h、温度20~22℃，每周将愈伤组织转移到新的培养基中，共转移四次；(5)再生芽诱导：将步骤4中第四次转移培养一周后的愈伤组织作为诱导再生芽的种源，无菌条件下，将愈伤组织接种于再生芽诱导培养基中，于光强2000~3000Lx、光照时间12h、温度20~22℃下诱导芽的形成；(6)再生根的诱导：将步骤5中获得的再生芽用无菌水冲洗干净后接种于再生根培养基中，于光强1000~2000Lx、光照时间16h、温度20~22℃下诱导根的形成；(7)炼苗、移植：将步骤6中获得再生植株转移到蛭石中，于室内培养7～10d后转移到大田培养；上述愈伤组织培养基的配方以MS培养基为基础培养基，1L培养基中添加蔗糖30g、琼脂6g、2,4‑D 1mg、IAA1mg、ZT0.5mg、KT 0.5mg；上述愈伤组织增殖培养基的配方为，以MS培养基为基础培养基，1L培养基中添加蔗糖40g、琼脂6g、IAA0.3mg、ZT0.2mg、KT 0.2mg、抗坏血酸20mg；上述再生芽诱导培养基的配方为，以MS 培养基为基础培养基，1L培养基中添加蔗糖30g、琼脂6g、NAA1mg、IAA 1mg、6‑BA 1mg；上述再生根诱导培养基的配方为，以MS培养基为基础培养基，1L培养基中添加蔗糖30g、琼脂7g、IAA 2mg、ZT 0.5mg、KT 0.5mg。