一种荸荠组培苗高效增殖的方法

摘要

本发明公开了一种荸荠组培苗高效增殖的方法，该方法使用间歇浸没式生物反应器对荸荠组培苗进行增殖培养，利用间歇浸没培养的方法，先后使用液体继代培养基和液体生根培养基进行荸荠组培苗的增殖培养。本发明方法可有效的防止营养沉积和有害物质在培养基中的积累，从而更有效利用培养基的营养成分；本发明的培养基配方适合于使用间歇浸没式培养增殖荸荠组培苗，在本发明的培养基配方和培养条件下，荸荠组培苗的长势和增殖率大大优于传统方法，生根苗移栽驯化的成活率高，缩短生产时间，提高生产效率，并且降低了生产成本和劳动力成本，可大规模推广应用。

主权项

一种荸荠组培苗高效增殖的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将脱毒培养的荸荠组培苗接种入间歇浸没式生物反应器中；其中，荸荠组培苗为第4代或第5代荸荠组培苗，将荸荠组培苗接种入间歇浸没式生物反应器中的接种密度是10～15丛/L；(2)利用间歇浸没式培养方法，使用液体继代培养基对荸荠组培苗进行继代增殖培养；其中，液体继代培养基的配方为：MS液体培养基+6‑BA2.5mg/L+NAA0.01mg/L+白糖30g/L，pH值为5.8～6.2，间歇式浸没培养的浸没频率为每4小时浸没10分钟，连续培养40天；(3)利用间歇浸没式培养方法，使用液体生根培养基对继代增殖培养后的荸荠组培苗进行生根培养；其中，液体生根培养基的配方为：MS液体培养基+6‑BA0.1mg/L+NAA 1.0mg/L+白糖30g/L，pH值为5.8～6.2，间歇式浸没培养的浸没频率为每6小时浸没10分钟，连续培养30天；其中，在使用间歇浸没式生物反应器对荸荠组培苗进行增殖培养的整个过程中，控制培养条件为：光照强度1500lx，培养温度28℃，压力0.05～0.08Mpa，光照16h/d，黑暗8h/d。