一种固体海洋红酵母制剂及其制备方法和应用

摘要

本发明公开了一种固体海洋红酵母制剂，它主要由复合保护剂和浓缩的海洋红酵母菌泥制成，二者的质量比为1.5~2.2︰1，所述固体海洋红酵母制剂中海洋红酵母菌的细胞密度为2000~4000亿/克，细胞活性为70~80%，所述的保护剂包括脱脂奶粉和蔗糖。还公开了上述固体海洋红酵母制剂的制备方法，其先采用液体深层通气连续流加的培养方式进行海洋红酵母菌的高密度培养，再采用真空冷冻干燥方法干燥，该固体海洋红酵母制剂海洋红酵母的细胞存活率能提高到70～80%，制剂中细胞密度能达到2000～4000亿/克，且由于产品为固体形式，保质期长，便于运输，还能作为添加剂用于水产饲料中。

主权项

一种固体海洋红酵母制剂，其特征是：它由复合保护剂和浓缩的海洋红酵母菌泥制成，二者的质量比为1.5~2.2 ：1，所述的复合保护剂为脱脂奶粉、蔗糖和水，所述的固体海洋红酵母制剂中海洋红酵母的细胞密度为2000~4000亿/克，细胞活性为70~80%；所述的浓缩的海洋红酵母菌泥通过如下方法制备获得：(1) 活化传代培养：以海洋红酵母胶红酵母为菌种，以种子培养液为培养基，菌种采用斜面活化传代，培养温度为24～30℃，培养时间为36～48小时；(2) 摇瓶扩大培养：挑取2~3环斜面活化传代后的菌种接种于150mL种子培养液中，在24～30℃、150～250 rpm条件下摇瓶培养28～36小时；然后，将培养液按5~10%的质量百分含量转接种于3L～5L种子培养液中，按相同条件进行再次培养；(3) 种子罐扩大培养：将摇瓶扩大培养后的培养液按5~10%的质量百分含量接种入30L种子培养液中，调节通气量为1：0.6V.V.m， 通气搅拌速度为300～450 rpm、温度为24～30℃培养22～28h，接着将培养液按5~10%的质量百分含量转接种于500L种子培养液中，按相同条件进行再次培养；(4) 发酵罐培养：将经种子罐扩大培养的培养液按5~10%的质量百分含量转接于发酵培养液中，通气量为1：0.6 V.V.m，搅拌速度为300～450 rpm，温度为24～30℃，通气培养20～28h；在发酵培养过程中流加氨水，流加氨水的用量以发酵液pH5.0为控制点，当发酵罐内的溶氧开始上升时，终止发酵；(5) 离心、洗涤、浓缩：发酵液经离心分离，得到浓缩的酵母菌泥，浓缩后的酵母菌泥经水洗后再次离心浓缩处理，4℃低温保存得到的浓缩的海洋红酵母菌泥；步骤(1)‑(3)中采用的种子培养液含以下重量份的组分：水1000、 葡萄糖35～45、蛋白胨 1.8～2.2、 酵母粉 5.5～6.5、 磷酸二氢钾 0.8～1.2、磷酸二氢钠 2.8～3.2、硫酸镁 7.0～8.0、氯化钾 2.8～3.2、氯化钠 5～15，其pH为5.0～5.5，该种子培养液在使用前经121℃下高压灭菌20分钟；步骤(4)中采用的发酵培养液含有以下重量份的组分：水1000、葡萄糖80～110、蛋白胨 3.0～4.0、 酵母粉 5～7、 磷酸二氢钾 0.8～1.2、磷酸二氢钠 2.8～3.2、硫酸镁7.0～8.0、氯化钾2.8～3.2、氯化钠 8～12，其pH为5.0～5.5，该发酵培养液在使用前经121℃下高压灭菌20分钟。