一种北虫草液体菌种的制备方法

摘要

一种北虫草液体菌种的制备方法，包括以下步骤：（1）、配制培养基：（2）、装瓶灭菌：将配好的培养基装入培养瓶，封口膜封口后，放入高压灭菌锅中灭菌；（3）、接种：灭菌完成后，等培养液温度冷却后，接入北虫草斜面母种；（4）、培养：将接种好的培养瓶放到培养箱中避光密闭培养，培养6-8天后即可得到北虫草的液体菌种。本发明不使用发酵罐、摇床等设备，不需要通气或者搅拌培养，可以减少投资，降低生产成本，非常适合大批量的成产和推广；制备的北虫草液体菌种，及时使用能保证菌丝的良好活性，样品中菌丝浓度适中，培养液清澈透亮，便于观察菌丝生长状况，能及时发现和处理污染的菌种，减少因为菌种污染接种造成的不必要损失。

主权项

一种北虫草液体菌种的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）、配制培养基：将洗净新鲜的马铃薯去皮，称取200g切成小块、小条或薄片，向其中加水1000 mL，煮沸20‑30 min，用事先浸湿拧干的4层纱布过滤去渣，收集液汁，并向其中加入葡萄糖20 g、磷酸二氢钾l g以及硫酸镁0.5 g搅拌均匀，并补足水分定容至1000ml，最后用氢氧化钠水溶液调整pH至7.0‑7.2得到培养基；（2）、装瓶灭菌：按照每瓶装入的液体量为培养瓶体积的60%，将配好的培养基装入培养瓶，封口膜封口后，放入高压灭菌锅中灭菌；所述的培养瓶为三角瓶、广口的塑料瓶或玻璃瓶；（3）、接种：灭菌完成后，等培养液温度冷却到28℃以下后，接入北虫草斜面母种；（4）、培养：将接种好的培养瓶放到培养箱中避光密闭培养，培养6‑8天后即可得到北虫草的液体菌种；所述培养箱温度控制在20‑25℃，湿度保持在60‑70%；所述避光密闭培养需要将接种的菌种瓶先静置培养48h，以后每天人工摇晃2‑3次，每次2分钟，防止菌丝结块，同时检查菌丝生长情况，发现污染的菌种及时剔除。