一种从菠菜中提取铁蛋白的方法

摘要

本发明公开了一种从菠菜中提取铁蛋白的方法，将采集来的新鲜菠菜进行表面杀菌，经榨汁、酶解后通过蛋白质沉淀、离心分离再通过溶解、透析得到最终产物。本发明制得的铁蛋白成品的含铁量可达31.6mg/kg，因此本发明能充分把菠菜中的铁提取出来，解决了贫血病人“补铁”难的问题。

主权项

一种从菠菜中提取铁蛋白的方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）先将采集来的菠菜去除黄叶及虫咬部分，用清水冲洗干净后，放入含70%‑75%的酒精溶液中浸泡，然后在筛网上沥干酒精溶液，放入无菌水中洗去酒精药液，在筛网上沥干，再用无菌水重复洗一次；（2）将杀菌清洗后的菠菜立即送入无菌工作室内进行后续处理，先用切草机将菠菜切成1‑2cm的小段，然后放入榨汁机中进行榨汁，榨汁后加入纤维素酶和果胶酶，混合均匀，置于45‑55℃环境温度下进行酶促反应，反应过程中保持温度不变，持续时间为25‑35min；（3）将经过酶促反应的溶液用灭菌的塑料容器收集，利用真空过滤机对其进行真空脱气过滤，以脱去溶液中溶解的氧；（4）将经过真空过滤后的溶液倒入容器中，在75℃恒温水浴环境中加热时间持续15min，并注意缓慢匀速搅拌使溶液受热均匀，使不耐热的杂蛋白变性沉淀，保持溶液处于静置状态4℃环境中冷却过夜；（5）用离心管取经过冷却过夜的溶液在高速冷冻离心机中以15000g的离心力离心30min，弃沉淀，用广口容器取上清液；以35g硫酸胺/100ml液体的比例缓慢地向上清液中加入硫酸胺粉末，同时缓慢搅拌，沉淀蛋白质，保持溶液处于静置状态置4℃环境中再冷却过夜；（6）取经过再次冷却过夜后的溶液置于离心管中，然后在高速冷冻离心机中以15000g的离心力离心30min，弃上清，取黄色沉淀于大烧杯中，加入0.025mol/L的Tris‑HCL缓冲液溶解，边加入边搅拌直至沉淀完全溶解后，停止加入0.025mol/L的Tris‑HCL缓冲液；（7）将经过溶解沉淀后的的溶液移至透析袋中，保持4℃环境温度不变；将溶液在0.025mol/L的Tris‑HCL缓冲液中透析，并多次更换缓冲液以除去盐类，得到黄色的铁蛋白溶液；（8）将透析后的溶液用小型真空减压浓缩器进行浓缩处理，将经浓缩后的铁蛋白溶液在空气压力0.3MPa，进口温度140‑160℃，出口温度65‑75℃工艺条件下用离心喷雾干燥机进行喷雾干燥，即得粉末状米黄色铁蛋白成品。