发明名称 一种提高人金属硫蛋白MT2a原核表达载体表达量的方法
摘要 本发明公开了一种提高人金属硫蛋白MT2a原核表达载体表达量的方法。该方法包括:人工合成密码子优化的MT2a DNA分子,该分子还包括DNA内切酶识别序列NcoI、SpeI、NheI;将所述DNA分子构建到pET28a(+)的NcoI/NheI克隆区;再经过系列重组使包含核糖体结合区的MT编码基因扩增到4拷贝。本发明的方法适用于所有小分子多肽(100个氨基酸以内的)表达载体的构建,整个过程操作简单,快速,所制备的原核表达载体提高了MT蛋白的表达量,降低了成本,提高了工作效率。
申请公布号 CN105238802A 申请公布日期 2016.01.13
申请号 CN201510702740.4 申请日期 2015.10.26
申请人 盘古基因生物工程(南京)股份有限公司 发明人 李万波
分类号 C12N15/69(2006.01)I;C12N15/12(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I 主分类号 C12N15/69(2006.01)I
代理机构 南京天华专利代理有限责任公司 32218 代理人 傅婷婷;徐冬涛
主权项 一种提高人金属硫蛋白MT2a原核表达载体表达量的方法,其特征在于包括将含经密码子优化后的人金属硫蛋白分子MT2a的编码区的串联单位在原核表达载体克隆区串联重复4次形成包含4拷贝人金属硫蛋白顺反子的串联重复区;将含串联重复区的原核表达载体转化原核宿主细胞;培养并大量繁殖该细胞,利用诱导剂诱导导人金属硫蛋白分子表达。
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