发明名称 |
一种提高人金属硫蛋白MT2a原核表达载体表达量的方法 |
摘要 |
本发明公开了一种提高人金属硫蛋白MT2a原核表达载体表达量的方法。该方法包括:人工合成密码子优化的MT2a DNA分子,该分子还包括DNA内切酶识别序列NcoI、SpeI、NheI;将所述DNA分子构建到pET28a(+)的NcoI/NheI克隆区;再经过系列重组使包含核糖体结合区的MT编码基因扩增到4拷贝。本发明的方法适用于所有小分子多肽(100个氨基酸以内的)表达载体的构建,整个过程操作简单,快速,所制备的原核表达载体提高了MT蛋白的表达量,降低了成本,提高了工作效率。 |
申请公布号 |
CN105238802A |
申请公布日期 |
2016.01.13 |
申请号 |
CN201510702740.4 |
申请日期 |
2015.10.26 |
申请人 |
盘古基因生物工程(南京)股份有限公司 |
发明人 |
李万波 |
分类号 |
C12N15/69(2006.01)I;C12N15/12(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I |
主分类号 |
C12N15/69(2006.01)I |
代理机构 |
南京天华专利代理有限责任公司 32218 |
代理人 |
傅婷婷;徐冬涛 |
主权项 |
一种提高人金属硫蛋白MT2a原核表达载体表达量的方法,其特征在于包括将含经密码子优化后的人金属硫蛋白分子MT2a的编码区的串联单位在原核表达载体克隆区串联重复4次形成包含4拷贝人金属硫蛋白顺反子的串联重复区;将含串联重复区的原核表达载体转化原核宿主细胞;培养并大量繁殖该细胞,利用诱导剂诱导导人金属硫蛋白分子表达。 |
地址 |
210032 江苏省南京市浦口高新区新锦湖路3-1号中丹园B座8楼 |