一种酶法合成头孢克洛的分离及纯化方法

摘要

一种酶法合成头孢克洛的分离及纯化方法，包括7-ACCA在水相经由氨水调溶后，加入固定化酶，保持温度10~35℃，滴加入苯甘氨酸甲酯盐酸盐或苯甘氨酸甲酯甲磺酸盐，不断保持反应pH值，pH值范围在5.5~7.5，随着酶化反应的发生，生成的头孢克洛不断从体系中析出，将酶催化液不断采用过滤分离的办法，将固定化酶M-1与头孢克洛分离，母液循环回反应器，直至7-ACCA完全反应，将所得的头孢克洛湿品纯化即得头孢克洛。本发明在头孢克洛的析出过程中，即将头孢克洛从酶促反应液中分离出来，从而解决了酶催化反应的分离、反应浓度问题。

主权项

一种酶法合成头孢克洛的分离及纯化方法，其特征在于：包括一酶催化反应体系，该酶催化反应体系为在固定化酶存在的条件下，用7‑氨基‑3‑氯头孢烷酸和活性形式的D‑苯甘氨酸衍生物进行酶催化合成反应得到含有头孢克洛晶体的酶促反应液；所述酶催化合成反应的pH值为5.5~7.5，所述酶催化合成反应的温度为10~35℃；所述固定化酶的粒径为200~500微米；在所述酶催化合成反应结束后，将所述固定化酶从所述酶促反应液中分离出来得到固定化酶和酶促反应液母液；在所述酶催化合成反应的过程中，间断地或者连续地将所述酶促反应液首先过125~150微米的筛网，筛上物返回至所述酶催化反应体系中，筛下物再经过滤后得到滤出物和滤液，所述滤液返回至所述酶催化反应体系中，所述滤出物即为头孢克洛湿品；在0~25℃温度条件下，将所述头孢克洛湿品用酶促反应液母液溶解，然后用盐酸调节pH 值至0.1~2使头孢克洛溶解得到质量浓度为5~20%的头孢克洛水溶液；接下来向所述头孢克洛水溶液中加入活性炭脱色，所述活性炭与所述头孢克洛水溶液两者之间的质量比例为1~10 : 100；接下来进行过滤得到滤液，然后向所述滤液中加入氨水调节pH值至2.5~5.5使头孢克洛析出，过滤后得到滤出物和滤液，该滤液即为重结晶母液，所述滤出物经洗涤和干燥步骤即得头孢克洛产品。