发明名称 一种快速高效筛选他克莫司高产菌株的方法
摘要 发明提供了一种基于96孔板高通量筛选他克莫司高产菌株的筛选方法,包括以下步骤:(1)取他克莫司产生菌孢子悬液涂布于固体培养基上,于25-30℃下培养9-12天;(2)在固体培养基上逐个挑取单菌落,分别接种至装有发酵培养基的96孔板的板孔中,于25-30℃下培养并离心处理;(3)培养至8-32h,向96孔板的每个板孔中添加0.5%-1.5%的油;(4)培养至36-54h,测定脂肪酶活性确认筛选结果。在发酵过程中,向培养基中添加油,他克莫司产生菌代谢油时脂肪酶活力发生变化,以脂肪酶活力为指标,筛选出酶活力高的菌株,可大大减轻工作量,提高筛选效率,并且操作程序简单,方法稳定,重现性好。
申请公布号 CN105219658A 申请公布日期 2016.01.06
申请号 CN201510725146.7 申请日期 2015.10.29
申请人 无锡福祈制药有限公司 发明人 曹峥;史佳栋;付静;游云龙;成梁;张莹;赵文俊;杨亮
分类号 C12N1/14(2006.01)I;C12Q1/44(2006.01)I 主分类号 C12N1/14(2006.01)I
代理机构 北京商专永信知识产权代理事务所(普通合伙) 11400 代理人 高之波;邬玥
主权项 一种基于96孔板高通量筛选他克莫司高产菌株的筛选方法,包括以下步骤:步骤(1)取他克莫司产生菌孢子悬液涂布于固体培养基上,于25‑30℃下培养9‑12天;步骤(2)在固体培养基上逐个挑取单菌落,分别接种至装有发酵培养基的96孔板的板孔中,于25‑30℃下培养,所述96孔板固定于离心机中进行离心处理,所述离心机的转速为200‑300r/min;步骤(3)培养至8‑32h,向96孔板的每个板孔中添加0.5%‑1.5%的油,直至形成平整的油膜;步骤(4)培养至36‑54h,测定脂肪酶活性,根据脂肪酶活性数据判断不同板孔中他克莫司产量,确认筛选结果。
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