发明名称 |
一种快速高效筛选他克莫司高产菌株的方法 |
摘要 |
发明提供了一种基于96孔板高通量筛选他克莫司高产菌株的筛选方法,包括以下步骤:(1)取他克莫司产生菌孢子悬液涂布于固体培养基上,于25-30℃下培养9-12天;(2)在固体培养基上逐个挑取单菌落,分别接种至装有发酵培养基的96孔板的板孔中,于25-30℃下培养并离心处理;(3)培养至8-32h,向96孔板的每个板孔中添加0.5%-1.5%的油;(4)培养至36-54h,测定脂肪酶活性确认筛选结果。在发酵过程中,向培养基中添加油,他克莫司产生菌代谢油时脂肪酶活力发生变化,以脂肪酶活力为指标,筛选出酶活力高的菌株,可大大减轻工作量,提高筛选效率,并且操作程序简单,方法稳定,重现性好。 |
申请公布号 |
CN105219658A |
申请公布日期 |
2016.01.06 |
申请号 |
CN201510725146.7 |
申请日期 |
2015.10.29 |
申请人 |
无锡福祈制药有限公司 |
发明人 |
曹峥;史佳栋;付静;游云龙;成梁;张莹;赵文俊;杨亮 |
分类号 |
C12N1/14(2006.01)I;C12Q1/44(2006.01)I |
主分类号 |
C12N1/14(2006.01)I |
代理机构 |
北京商专永信知识产权代理事务所(普通合伙) 11400 |
代理人 |
高之波;邬玥 |
主权项 |
一种基于96孔板高通量筛选他克莫司高产菌株的筛选方法,包括以下步骤:步骤(1)取他克莫司产生菌孢子悬液涂布于固体培养基上,于25‑30℃下培养9‑12天;步骤(2)在固体培养基上逐个挑取单菌落,分别接种至装有发酵培养基的96孔板的板孔中,于25‑30℃下培养,所述96孔板固定于离心机中进行离心处理,所述离心机的转速为200‑300r/min;步骤(3)培养至8‑32h,向96孔板的每个板孔中添加0.5%‑1.5%的油,直至形成平整的油膜;步骤(4)培养至36‑54h,测定脂肪酶活性,根据脂肪酶活性数据判断不同板孔中他克莫司产量,确认筛选结果。 |
地址 |
214000 江苏省无锡市锡山经济开发区蓉洋一路2号 |