一种利用双酶解法制备肝素钠的方法

摘要

本发明属于生化行业领域，特别涉及一种利用双酶解法制备肝素钠的方法。该利用双酶解法制备肝素钠的方法包括以下步骤：采用双酶解方法将肝素钠-蛋白复合体中的肝素钠进行解离，然后通过升温、树脂吸附、洗脱、醇沉、烘干等步骤将肝素钠完全提取出来，提高肝素钠收率。采用双酶解可以适当降低盐浓度，减轻污染，降低蒸汽用量和降温水用量。大生产可以采用猪胰脏活化后使用，每6吨反应液猪胰脏成本100元左右。猪胰脏成本和蒸汽成本可以抵消。

主权项

一种利用双酶解法制备肝素钠的方法，其特征在于：包括以下步骤：（1）酶解:取小肠粘膜，加入肠衣专用盐至料液的盐度为3.0‑4.0%，与水一起置于酶解罐中，调节PH7.5‑8，每4kg小肠粘膜加入胰酶0.8g,加热至温度45‑55℃，保温1小时后，过80目滤膜，收集过滤液，在滤液中加入2709碱性蛋白酶，保温1小时；(2)升温:步骤（1）结束后，将步骤（1）中酶解中的滤液加热至温度60‑65℃，保温5分钟，过80目滤膜，收集过滤液；(3)树脂吸附:将步骤（2）中所得过滤液加入到吸附罐中，每40L滤液中加4‑6g树脂，进行搅拌，然后降温至55℃，保温55℃并搅拌吸附8小时后过滤，放出废液；(4)洗脱:步骤（3）结束后，收集过滤后的树脂，每克树脂中加入质量分数为24%的饱和盐水20ml，保持55℃洗脱，收集洗脱液；(5)醇沉:将步骤（4）中收集的洗脱液过滤，然后移入沉淀罐中，加入乙醇沉淀肝素钠；(6)烘干:步骤（5）结束后，将收集的沉淀物过滤干净进行烘干脱水，即可得到肝素钠。