使用发卡寡核苷酸扩增核酸的方法

摘要

所述公开的内容提供了使用一含有在所述3’端有一第一目标结合区域和在所述5’端有一第二目标结合区域和两者之间的有连接区域的发夹寡核苷酸扩增一目标核酸的方法。所述连接区域可包括多种的用户定义的序列或原件，可以对所述目标核酸进行进一步操作。比如，扩增、鉴定和/或测序后的捕获。所述目标结合区域与所述目标核酸结合，其3’端作为一引物起始所述目标核酸序列的延伸，所述间隙的连接产生一环状核酸的形成。所述环状引物能用于多种过程，包括扩增和测序。

主权项

一种扩增目标核酸的方法，所述方法包括步骤：A、在一含有一发夹寡核苷酸和一目标核酸的第一混合物中使一第一和一第二目标结合区域退火与一目标核酸结合，其中所述发夹寡核苷酸的3’端含有所述第一目标结合区域，5’端含有所述第二目标结合区域，在所述第一和所述第二目标结合区域之间含有用户定义的连接区域，其中所述连接区域含有一个或多个捕获原件，延伸所述发夹寡核苷酸通过所述目标核酸以产生一含有一第一核酸和所述目标核酸的第一双重核酸；B、连接所述第一核酸的末端以产生一环状核酸，选择性地从所述目标核酸移除所述环状核酸；C、在一第二混合物中在一固相载体上捕获所述环状核酸，其中所述固相载体含有一与所述连接区域的所述捕获原件结合的捕获手段，所述第二混合物含有一能与所述连接区域的至少一个引物结合位点结合的一引物，延伸所述引物以产生一含有一第二核酸和所述第一核酸的第二双重核酸；和，D、从所述第一核酸解离所述第二核酸，从而扩增所述目标核酸。