一种从微囊藻中提取类菌胞素氨基酸Shinorine的方法

摘要

本发明公开了一种从微囊藻中提取类菌胞素氨基酸Shinorine的方法，具体如下：1）将微囊藻粉与甲醇混合，超声，加热后，离心并收集上清；2）将上清液氮气吹干与蒸馏水复溶；3）加入氯仿混匀；4）离心，收集上清；5）针式过滤器过滤；6）利用strata-x固相萃取小柱处理，滤液冷冻干燥。利用本发明提取的类菌胞素氨基酸Shinorine，该方法简单，操作方便，安全可靠，最终产品的纯度达到85%-95%，可以作为标准品使用，为后续大规模提取定量打下坚实基础。

主权项

一种从微囊藻中提取类菌胞素氨基酸Shinorine的方法，具体步骤如下：1)将微囊藻粉与无水甲醇以1g：10‑40ml的比例进行混合，先置于超声清洗仪中100％超声处理5‑10min，然后置于40‑50℃的水浴锅中处理2.5‑4小时，期间上下混匀数次，9000‑11000rpm条件下离心，离心15‑20min，取上清；滤渣以上述微囊藻粉与无水甲醇的比例重新加入无水甲醇抽提，重复抽提2～3次，将收集的上清合并；2)将收集的上清液置于氮吹仪中，氮气吹干，以蒸馏水与藻粉重量比为1:1～5:1加入蒸馏水复溶；3)在复溶后溶液中加入等体积的氯仿，充分混匀；4)以9000‑11000rpm/min的条件下离心15‑20min，收集上清液；5)上清液过0.22μm针式过滤器，收集滤液；6)滤液再经过strata‑x固相萃取小柱处理，收集的滤液在‑50～‑60℃下冷冻干燥后称重；所述的固相萃取的具体步骤为：活化：先使用10‑40ml的无水甲醇，然后使用10‑40ml超纯水活化小柱，流速为2‑5ml/min；上样：上样前样品溶液中加入0.2m/L的NaOH溶液，使样品pH值到6.5‑8.0；淋洗：先使用无水甲醇20‑60ml，再使用超纯水活化20‑60ml；流速为2‑5ml/min；洗脱：洗脱溶液使用0.1％体积比的HCl甲醇10‑20ml，流速2‑5ml/min，收集的滤液在‑50～‑60℃下冷冻干燥后称重，所述HCL浓度为1m/l。