一种小反刍兽疫病毒一步法实时荧光定量RT-PCR诊断试剂盒及制备、使用方法

摘要

本发明公开了小反刍兽疫病毒一步法实时荧光定量RT-PCR诊断试剂盒的原料配方及制备、使用方法。其原料配方为：1000~2000μL反应液，100~200μL酶混合液，100~200μL荧光探针、100~200μL阳性对照、100~200μL阴性对照和2~3mL超纯水。反应液包括一步法RT-PCR缓冲液、Oligo dT Primer、引物混合液、Mg²⁺及dNTP,五种液体于反应液中体积比为12:1:1:2:18；酶混合液包括TaKaRa Ex Taq HS和反转录酶PrimeScript RTase、RNases抑制剂，三种溶液于酶混合液中体积比为1:40:8。实施过程包括以下内容：1、制备反应液；2、制备荧光探针；3、制备阴、阳性对照；4、检测待检样品。本发明对羊养殖场小反刍兽疫病原感染羊疑似病例检测具有比普通RT-PCR更快速、准确、有效的优点。

主权项

一种小反刍兽疫病毒一步法实时荧光定量RT‑PCR诊断试剂盒，其特征在于：本试剂盒的原料配方为：1000~2000μL反应液、100~200μL酶混合液、100~200μL荧光探针、100~200μL阳性对照、100~200μL阴性对照和2~3mL超纯水；反应液包括一步法RT‑PCR缓冲液、Oligo dT Primer、引物混合液、Mg²⁺及dNTP，五种液体于反应液中体积比为12:1:1:2:18；酶混合液包括TaKaRa Ex Taq HS和反转录酶PrimeScript RTase、RNases抑制剂，三种溶液于酶混合液中体积比为1:40:8。