一种羊毛甾烷三萜类化合物的制备方法

摘要

本发明涉及一种羊毛甾烷三萜类化合物的制备方法，该方法采用三维液相色谱技术，首先以正己烷－乙醇为流动相，以正相硅胶色谱柱为一维制备色谱柱，对甘遂提取物进行组分切割，收集目标组分为一维分离组分；再以水-乙腈为流动相，以C18(250mm×20mm)色谱柱为二维制备色谱柱，对一维分离组分进行组分切割，收集，旋转蒸发浓缩，得到二维分离组分；最后以C18(250mm×10mm)色谱柱为三维制备色谱柱，得到高纯度的羊毛甾烷三萜类化合物，纯度可以达到97％以上，本发明制备过程重复性高，可操作性好，同时甘遂资源丰富，容易获取，适合大规模生产的要求。

主权项

一种羊毛甾烷三萜类化合物的制备方法，其特征在于：具体步骤如下：(1)制备甘遂粗提物：以甘遂为原料，磨成粉末状得到干燥的甘遂粗粉，甘遂粗粉与乙酸乙酯的料液比按kg/L计1:(8‑10)将甘遂粗粉用乙酸乙酯常温下浸泡5h，间歇搅拌，提取1‑3次，静置过夜，取上清，过滤，所得滤液进行减压浓缩至干，溶于正己烷‑乙醇溶液中，进行减压抽滤，得到甘遂浓度为50‑500mg/mL的提取液；(2)对所得到的提取液进行一维液相色谱分离：采用的流动相为二元混合有机相，其中A相是正己烷，B相是乙醇；进样量为50‑300mL/针；流动相流速为600mL/min；检测器为紫外检测器，检测波长200‑260nm；梯度洗脱；根据紫外吸收光谱收集目的组分，减压浓缩至干，得到一维液相组分；(3)用甲醇溶解一维液相组分，溶解至浓度为80‑130mg/mL；(4)进行二维液相色谱分离：采用的流动相为二元混合有机相，其中A相是水，B相是乙腈；进样量为1.0‑4.0mL/针；流动相流速为10‑18mL/min；检测器为紫外检测器，检测波长200‑260nm；梯度洗脱；根据紫外吸收光谱收集目的组分，减压浓缩至干，得到二维液相组分；(5)用甲醇溶解二维液相组分，溶解至浓度为50‑200μg/mL；(6)进行三维液相色谱分离：采用的流动相为二元混合有机相，其中A相是水，B相是乙腈；进样量为10‑100μL/针；流动相流速为3‑5mL/min；检测器为紫外检测器，检测波长200‑260nm；梯度洗脱；根据紫外吸收光谱收集目的组分，减压浓缩至干，得到目的产物。