多菌种发酵壳聚糖生产抗病型寡糖的制备方法

摘要

本发明公开了一种多菌种发酵壳聚糖生产抗病型寡糖的制备方法，利用多种菌种发酵产生的酶使壳聚糖降解生成寡糖，发酵过程中黄柏、丁香、茵陈以及白头翁混合制成的中药提取物的加入使得抗病型寡糖对真菌引起的农作物疾病有良好的治疗效果，增强农作物的抗病性，使农产品的产量更高且品质得到提高，制备方法绿色环保，制备过程中超声波的多次使用使得抗病型寡糖的收率高。

主权项

一种多菌种发酵壳聚糖生产抗病型寡糖的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一：将质量比为2∶2∶1∶1的黄柏、丁香、茵陈以及白头翁粉碎后混合，在60～70℃下，控制搅拌速度为450～550转/min，超声波频率30～40kHz，加热1～2h后，过滤，收集第一滤液与第一滤渣；在所述第一滤液中加入体积分数为75％的酒精，先在常温下，控制超声波频率50～60kHz，控制搅拌速度为100～200转/min，搅拌20～30min后，在0～4℃静置4～8h，过滤，收集滤渣，40～50℃下干燥3～6h后粉碎得到中药提取物；步骤二：按重量份数计，取枯草芽孢杆菌1～5份，巨大芽孢杆菌0.2～2份，酵母菌0.5～3份扩大培养得到多菌种菌液后，将35～45份壳聚糖和所述多菌种菌液加入到发酵槽中得到第一混合物，在发酵槽中调节所述第一混合物的含水量为35～40％，之后在32～35℃下发酵5～8h；步骤三：按重量份数计，将5～8份中药提取物均分为多份，分次加入到发酵槽中，每次间隔2～3h，在32～35℃下发酵8～12h得到第二混合物；步骤四：将所述第二混合物过滤，得到滤液为第二滤液，将所述第二滤液在65～75℃下控制搅拌速度为450～550转/min，超声波频率50～60kHz，加热40～60min后，过滤，得到滤液为第三滤液；步骤五：在所述第三滤液中加入体积分数为75％的酒精，在0～4℃静置4～8h，过滤，得到滤液为第四滤液，浓缩，干燥得到所述抗病型寡糖。