牛布鲁氏菌胶体金抗体检测试纸条

摘要

本发明涉及一种快速、高效、准确的牛布鲁氏菌胶体金诊断方法。该胶体金使用布鲁氏菌S2株脂多糖(LPS)作为测试线包被抗原，提高了检测的敏感性；改进了LPS纯化和纯度测定方法，使开发的试剂盒具有良好的特异性；本发明利用鼠抗牛IgG Fc端的单克隆抗体标记胶体金制成胶体金抗体检测试纸条的金胶垫，进一步提高了检测的特异性。本发明试纸条可用于检测牛血清中的布鲁氏菌抗体，具有特异性强，灵敏度高、方便快捷等特点。本发明对布鲁氏菌检测不需要复杂的检测仪器，特别适合牛场养殖人员和基层兽医使用。

主权项

一种牛布鲁氏菌胶体金抗体检测试纸条，其特征在于该试剂条主要含有：以制备的光滑型猪种布鲁氏菌S2株的脂多糖(LPS)作为测试线包被抗原(检测带)，以鼠抗牛IgG Fc端的单克隆抗体标记胶体金制成胶体金抗体检测试纸条的金胶垫(流动带)，以羊抗鼠IgG抗体作为检测试纸条的质控抗原(质控带)，同时含有试纸条样品吸收垫(样品垫)、玻璃纤维素膜(胶体金垫)、吸水纸；将喷有检测线、质控线的硝酸纤维素膜上端贴上吸水垫，下端贴上金标垫及样品吸收垫，以上各组分首尾相连，完整衔接，其中：(1)该胶体金试纸条中使用的包被抗原LPS来源于猪种布鲁氏菌(S2株)，该LPS对猪、牛、羊布鲁氏菌病的病原菌具有良好的敏感性，提高了试剂盒检测的敏感性；(2)LPS提取过程中增加了蛋白酶K消化和苯酚抽提步骤，提高了LPS纯度，减少了LPS中阴杂蛋白含量过高导致的非特异性反应；本试剂盒不仅能有效排除常规革兰氏阴性细菌对布鲁氏菌的干扰，而且能排除一般布病间接ELISA试剂盒无法区分小肠结肠炎耶尔森氏菌O9和大肠杆菌O157干扰的技术缺陷，提高了检测的特异性；(3)LPS的包被量基于对其纯度和质量的测定；(4)本发明利用鼠抗牛IgG Fc端的单克隆抗体标记胶体金制成胶体金抗体检测试纸条的金胶垫，进一步提高了检测的特异性。