发明名称 |
一种深海耐盐、耐碱蛋白酯酶的表达和纯化、晶体结构及其应用 |
摘要 |
本发明属于生物技术领域,具体为一种深海耐盐、耐碱蛋白酯酶的表达和纯化、晶体结构及其应用。本发明所述酯酶PE8含219个氨基酸,分子量为23.19kDa,来源于海洋细菌Pelagibacterium halotolerans B2T;酯酶PE8的晶结构由9个β折叠和8个α螺旋组成,其中,9个β折叠位于中心,8个α螺旋围绕在β折叠的周围;第118位丝氨酸、第169位天冬氨酸与第201位组氨酸构成催化三连体组成活性中心。酯酶PE8在表达菌株中高度可溶性表达,并且表现出良好的耐盐、耐碱及手性选择性,能催化3-(4-氟苯基)戊二酸二甲酯生产药物中间体(R)-3-(4-氟苯基)戊二酸单甲酯。该酯酶PE8的晶体结构在工业上应用于生产抗抑郁药物中间体、酶学底物改造及提高酶活方面具有广泛的应用前景。 |
申请公布号 |
CN105132393A |
申请公布日期 |
2015.12.09 |
申请号 |
CN201510576928.9 |
申请日期 |
2015.09.12 |
申请人 |
复旦大学 |
发明人 |
李继喜;黄静 |
分类号 |
C12N9/18(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I |
主分类号 |
C12N9/18(2006.01)I |
代理机构 |
上海正旦专利代理有限公司 31200 |
代理人 |
陆飞;盛志范 |
主权项 |
一种海洋细菌新型酯酶PE8的晶体三维结构,其特征在于:所述酯酶PE8包含219个氨基酸,分子量为23.19kDa;其中,所述晶体三维结构中的原子具有表1中所列的至少40%的原子坐标,或者酯酶PE8的晶体三维结构中至少40%氨基酸的主链碳骨架的原子结构坐标与表1中的坐标的平均根方差小于或等于1.7Å。 |
地址 |
200433 上海市杨浦区邯郸路220号 |