通过数字PCR对核酸的分析

摘要

本发明提供了分析核酸长度和核酸在样品中的相对丰度的方法，该方法基于个别模板分子的数字扩增。本发明具有许多应用，其包括在无创产前诊断、移植监测以及癌症和与病毒有关的疾病的检测和监测中的应用。

主权项

用于确定孕妇怀有的胎儿中两条染色体的相对量的试剂盒，其包括：(i)从获自所述孕妇的血浆样品制备多个相等的组分的试剂或工具，其中多于50％的所述组分中每组分含有不多于1个靶核酸分子；(ii)在每个组分中进行扩增反应的一种正向引物与两种反向引物，或者两种正向引物与一种反向引物，其中每对正向和反向引物扩增第一染色体和第二染色体上不同并且确定长度的种内同源基因序列；(iii)在每个组分中检测从每对正向和反向引物扩增的种内同源基因序列的试剂；(iv)鉴定含有扩增的较短长度的种内同源基因序列的组分的工具或试剂；(v)从步骤(iv)中鉴定的组分中计数含有扩增的来自第一染色体的种内同源基因序列的组分数目的工具；(vi)从步骤(iv)中鉴定的组分中计数含有扩增的来自第二染色体的种内同源基因序列的组分数目的工具；以及(vii)比较获自步骤(v)的组分数目与获自步骤(vi)的组分数目的工具，其中获自步骤(v)的数目大于获自步骤(vi)的数目表明胎儿中存在的第一染色体的量高于第二染色体的量。