一种扩增鱼类基因组DNA的方法

摘要

本发明涉及一种扩增鱼类基因组DNA的方法，属于分子生物学领域；所述的扩增鱼类基因组DNA的方法按照以下步骤进行：第一步、提取鱼类样品中的基因组DNA；第二步、使用限制性内切酶酶切鱼类的基因组DNA，限制性内切酶为：TaqⅠ；第三步、酶切DNA片段连接特定的寡核苷酸接头，并根据酶切位点序列与接头序列设计特定引物；酶切位点序列为：5′-AGCT-3′；寡核苷酸接头为：adaptor-F: 5′-GACGATGAGTCCTGAG-3′，adaptor-R: 5′-CGCTCAGGACTCAT-3′；第四步、采用PCR法扩增酶切片段，以此增加鱼类的基因组DNA的数量；所述的PCR引物为：primer: 5′-GATGAGTCCTGAGCGA-3′；本发明在扩增时使用高保真的Pfu DNA聚合酶，减小PCR过程中的扩增错误。

主权项

一种扩增鱼类基因组DNA的方法，其特征在于：所述的扩增鱼类基因组DNA的方法按照以下步骤进行：第一步、提取鱼类样品中的基因组DNA；第二步、使用限制性内切酶酶切鱼类的基因组DNA，限制性内切酶为：Taq Ⅰ；第三步、酶切DNA片段连接特定的寡核苷酸接头，并根据酶切位点序列与接头序列设计特定引物；酶切位点序列为：5′‑AGCT‑3′；寡核苷酸接头为：adaptor‑F:5′‑GACGATGAGTCCTGAG‑3′，adaptor‑R:5′‑CGCTCAGGACTCAT‑3′；第四步、采用PCR法扩增酶切片段，以此增加鱼类的基因组DNA的数量；所述的PCR引物为：primer:5′‑GATGAGTCCTGAGCGA‑3′。