单细胞中的靶蛋白和靶核酸的同时检测

摘要

提供了用于检测和分析核酸的方法和试剂。该方法采用邻近延伸测定用来检测感兴趣的靶核酸，例如靶RNA。另外，该方法可与用于检测蛋白的蛋白邻近延伸测定一起用于多重测定。

主权项

一种检测样品中靶核酸的方法，所述方法包括：(a)在反应混合物中孵育：i)包含靶核酸的样品；和ii)包含第一和第二探针的邻近探针对，其中：第一探针包含与所述靶核酸的第一靶(T)区段杂交的靶结合(TB)区段，和在所述探针的3’末端上的相互作用(I)区段，其中所述I区段与所述第二探针的3’末端上的I区段互补；且第二探针包含与紧密邻近所述第一T区段的所述靶核酸的第二、非重叠T区段杂交的TB区段，和在3’末端上的I区段，其中所述3’序列与所述第一探针的I区段互补，其中将所述反应混合物在其中所述第一探针的TB区段与所述靶核酸的第一T区段杂交且所述第二探针的TB区段与所述靶核酸的第二T区段杂交的条件下孵育，由此允许所述第一探针的I区段与所述第二探针的I区段杂交以形成包含所述第一和第二探针的I区段的双链体；(b)添加DNA聚合酶并在其中所述第一和/或第二探针被延伸的条件下保持所述反应混合物以获得第一延伸产物；(c)在包含扩增所述第一延伸产物、或其亚区的一对扩增引物的扩增反应混合物中扩增所述延伸产物、或其亚区；(d)检测(c)中获得的扩增子。