| 摘要 |
<p>La présente invention concerne un procédé de dosage d'acides nucléiques de type ADN, susceptibles d'être relargués dans un liquide d'écoulement d'une colonne de chromatographie par affinité, contenant un support sur lequel sont immobilisés lesdits aptamères ADN, lesdits acides nucléiques de type ADN représentant les aptamères ADN entiers, ou un fragment de ceux-ci, ledit procédé comprenant les étapes suivantes : a) fournir un échantillon dudit liquide d'écoulement susceptible de contenir des acides nucléiques de type ADN relargués par le support de la colonne de chromatographie par affinité ; b) réaliser une amplification par PCR des acides nucléiques de type ADN contenus dans ledit échantillon, en utilisant un mélange réactionnel comprenant (i) un couple d'amorces nucléotidiques sens et anti-sens non dégénérées spécifiques desdits acides nucléiques de type ADN et (ii) un agent intercalant fluorescent, afin d'obtenir un produit d'amplification sous la forme d'acides nucléiques ADN double brins complexés avec ledit agent intercalant fluorescent ; et c) quantifier les aptamères ADN, ou leurs fragments, en mesurant le niveau d'un signal de fluorescence généré par ledit produit d'amplification et en comparant ce niveau de fluorescence à celui obtenu par une gamme standard générée par une concentration connue dudit aptamère ADN.</p> |
