一种亚铁螯合抗菌肽制备方法

摘要

本发明公开一种亚铁螯合抗菌肽的制备方法，尤其是带鱼酶解蛋白亚铁螯合抗菌肽的制备方法。该方法包括以下步骤：1)将带鱼下脚料加入蒸馏水，然后加入木瓜蛋白酶进行酶解，调整酶解液的pH为5.5～6.5；2)将氯化亚铁加入到所述酶解液中，螯合温度为30～50℃，震荡螯合30～60min，离心，去沉淀，成为带鱼酶解蛋白亚铁螯合抗菌肽的粗提物。为了得到带鱼酶解蛋白亚铁螯合抗菌肽的精制品，对所述粗提物进行以下纯化步骤：1)冷冻干燥所述带鱼酶解蛋白亚铁螯合抗菌肽的粗提物，并将所述粗提物经葡聚糖凝胶层析洗脱分离，有抗菌活性的层析组分再经反向高效液相色谱洗脱，收集洗脱液；2)对所述洗脱液进行真空冷冻干燥，成为带鱼酶解蛋白亚铁螯合抗菌肽。本发明方法具有操作简单、分离提取率高、成本低的特点，可以使带鱼加工废弃物得到高值化利用。

主权项

一种带鱼酶解蛋白亚铁螯合抗菌肽的制备方法，包括以下步骤：1)将带鱼下脚料加入蒸馏水，然后加入木瓜蛋白酶进行酶解，调整酶解液的pH为5.5～6.5，酶解8～10h后灭酶，离心，去除沉淀；所述木瓜蛋白酶酶解温度为30～50℃，酶解时间为8～10h；灭酶温度为90～100℃，灭酶时间为10～20min；2)将氯化亚铁加入到所述酶解液中，螯合温度为30～50℃，震荡螯合30～60min，离心，去沉淀，成为带鱼酶解蛋白亚铁螯合抗菌肽的粗提物；所述氯化亚铁与酶解液体积份数之比为1～30∶40(mg∶mL)；螯合温度为30～50℃，震荡螯合30～60min；其中，对所述粗提物进行以下纯化步骤：1)真空浓缩、冷冻干燥所述带鱼酶解蛋白亚铁螯合抗菌肽的粗提物，并将所述粗提物经葡聚糖凝胶层析洗脱分离，有抗菌活性的层析组分再经反向高效液相色谱洗脱，收集洗脱液；2)对所述洗脱液进行真空冷冻干燥，成为带鱼酶解蛋白亚铁螯合抗菌肽。