荧光标记偶氮修饰核苷酸及其在DNA测序中的用途

摘要

本发明公开了一种荧光标记偶氮修饰核苷酸及其在DNA测序中的用途；其结构式如式I所示：，其中，R₁、R₂、R₃、R₄、R₅、R₆不同时为H；m，n为0～10的整数。与现有技术相比，本发明合成了一类新的基于偶氮连接单元的可逆终端；用变性PAGE胶即测序胶证明，该类可逆终端在模板为连续多个相同碱基时，一次只能延伸一个可逆终端，且延伸效率为100％，在还原剂作用下，可实现高效快递完全剪切，具有应用于DNA测序的巨大潜力和价值；同时，其合成所需原料简单易得，合成过程均为常规化学反应，可用于大规模推广使用。

主权项

一种基于偶氮连接单元的荧光标记核苷酸，其结构式如式I所示：其中，碱基选自U(或T)、C、A、G四个不同的碱基；荧光素选自BODIPY、罗丹明、香豆素、呫吨、花青、芘、酞菁、Alexa、Squaring染料、产生能量转移染料的组合以及其衍生物中的一种；R₁、R₂、R₃、R₄、R₅、R₆选自H、C2～C14的烷基、羧基、羧酸酯、羟基、PEG链、醚，且R₁、R₂、R₃、R₄、R₅、R₆不同时为H；m为0～10中的任一整数，n为0～10中的任一整数。