发明名称 |
一种检测核酸中5-甲基胞嘧啶的方法 |
摘要 |
本发明提供一种检测核酸中5-甲基胞嘧啶的方法,具体检测方法如下:将带荧光标记的核酸链先用亚硫酸氢钠处理,核酸链上的胞嘧啶将全部变为尿嘧啶,而5-甲基胞嘧啶则不受影响,再用化合物1可以特异性地与5-甲基胞嘧啶反应,而不与尿嘧啶、胸腺嘧啶、鸟嘌呤、腺嘌呤反应;由于热哌啶可以将核酸中损伤后的碱基位置打断,故与化合物1反应后的核酸链用热哌啶处理后,通过聚丙烯酰胺变性胶的核酸条带可以清楚的看到5-甲基胞嘧啶的位置和个数;化合物1的结构式为<img file="DDA0000808287140000011.GIF" wi="281" he="336" />。 |
申请公布号 |
CN105087816A |
申请公布日期 |
2015.11.25 |
申请号 |
CN201510611999.8 |
申请日期 |
2015.09.22 |
申请人 |
武汉大学 |
发明人 |
周翔;王雅芬;毛伍祥;刘朝兴 |
分类号 |
C12Q1/68(2006.01)I |
主分类号 |
C12Q1/68(2006.01)I |
代理机构 |
武汉科皓知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 42222 |
代理人 |
张火春 |
主权项 |
一种检测核酸中5‑甲基胞嘧啶的方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)将带荧光标记的核酸链用亚硫酸氢钠进行处理,将核酸上的胞嘧啶变为尿嘧啶;(2)加入化合物1进行处理,核酸链上5‑甲基胞嘧啶与化合物1特异性结合,所述化合物1的结构式为<img file="FDA0000808287110000011.GIF" wi="318" he="364" />(3)加入哌啶进行热处理,使与化合物1结合的5‑甲基胞嘧啶的位置特异性地断裂;(4)将步骤(3)处理后的核酸链用冰乙醇沉淀旋干后上样至电泳槽,通过聚丙烯酰胺变性胶中的条带位置和个数确定5‑甲基胞嘧啶的位置和个数。 |
地址 |
430072 湖北省武汉市武昌区珞珈山武汉大学 |