光敏染料锇配合物及其制备方法、癌变早期DNA氧化损伤快速检测试剂盒及检测方法

摘要

本发明提供了一种光敏染料锇配合物及其制备方法、使用该光敏染料锇配合物进行癌变早期DNA氧化损伤快速检测的试剂盒及检测方法。光敏染料锇配合物具有结构通式：LL’L’’Os-Y₄，其中Y为卤素离子、ClO₄^-、BF₄^-、PF₆^-或OTs^-，L、L’各自独立地选自2,2’-联吡啶及其衍生物、邻菲罗啉及其衍生物或DPPZ，L’’为具有2,2’-联吡啶和4,4’-联吡啶结构的配体。试剂盒至少包括：主体化合物八元瓜环（成分A）、上述光敏染料锇配合物（成分B）及纯水或磷酸盐、硼酸盐缓冲溶液（成分D）。使用该试剂盒，仅需一滴血样，即使在不借助任何仪器设备的条件下，凭借肉眼，在可见光照射下即可专一、快速检测8-oxoG。

主权项

一种制备光敏染料锇配合物的方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)制备以L、L’为配体的锇配合物中间体将各自独立地选自下述化合物的配体L、L’与以Y’为负离子的金属锇盐同时或依次进行配位反应，得到通式LL’Os‑Y’的锇配合物中间体，反应温度为20‑200℃，反应时间为1‑24h，反应溶剂选自甲醇、乙醇、乙二醇、乙腈、水、DMF、DMSO以及其中任意两种或两种以上按照任意比例组成的混合溶剂，以Y’为负离子的金属锇盐为(NH₄)₂[OsCl₆]、K₂OsCl₆或OsCl₃；(2)制备中间体1将4‑甲基‑4’‑R₃‑联吡啶与二异丙胺锂LDA反应，反应温度为‑78‑50℃，反应时间为0.5‑8h，反应溶剂选自二氯甲烷、氯仿、四氢呋喃、乙腈、DMF、DMSO以及其中任意两种或两种以上按照任意比例组成的混合溶剂，反应结束后，不经分离，直接向体系中加入Br(CH₂)_nBr，得到中间体1，反应温度为‑78‑100℃，反应时间为1‑48h，反应溶剂选自二氯甲烷、氯仿、四氢呋喃、乙腈、DMF、DMSO以及其中任意两种或两种以上按照任意比例组成的混合溶剂，(3)制备中间体2将中间体1与锇配合物中间体LL’Os‑Y’进行配位，得到中间体2，反应温度为20‑200℃，反应时间为1‑24h，反应溶剂选自甲醇、乙醇、乙二醇、乙腈、水、DMF、DMSO以及其中任意两种或两种以上按照任意比例组成的混合溶剂；(4)制备中间体3将中间体2在KI催化下与4,4’‑二联吡啶反应，得到中间体3，反应温度为20‑200℃，反应时间为1‑24h，反应溶剂选自甲醇、乙醇、乙二醇、乙腈、水、DMF、DMSO以及其中任意两种或两种以上按照任意比例组成的混合溶剂；(5)制备以L、L’、L”为配体的锇配合物将中间体3与C_1‑10碘代烷烃R₄I反应，得到通式LL’L”Os‑Y’的锇配合物，反应温度为20‑200℃，反应时间为1‑24h，反应溶剂选自甲醇、乙醇、乙二醇、乙腈、水、DMF、DMSO以及其中任意两种或两种以上按照任意比例组成的混合溶剂；(6)制备目标产物将锇配合物LL’L”Os‑Y’与含Y的钠盐、钾盐或铵盐按投料摩尔比1：1‑10进行负离子置换反应，得到目标产物LL’L”Os‑Y₄，反应温度为10‑100℃，反应时间为5分钟‑2h，反应溶剂选自甲醇、乙醇、乙二醇、丙酮、水、DMF、DMSO以及其中任意两种或两种以上按照任意比例组成的混合溶剂；或者在步骤(3)～(5)中分别进行以Y置换Y’的上述负离子置换反应，最终得到目标产物LL’L”Os‑Y₄；所述光敏染料锇配合物具有下列结构通式Ⅰ：LL’L”Os‑Y₄          (Ⅰ)通式Ⅰ中，Y为卤素离子、ClO₄^‑、BF₄^‑、PF₆^‑或OTs^‑，L、L’各自独立地选自以下配体：其中，R₁和R₂各自独立地选自H、C_1‑10烷基、CHO、COOH、NH₂、NO₂、CN、OH、SH、C_1‑6烷氧基、C_1‑6烷基氨基、C_1‑6酰胺基、C_1‑6卤代烷基、具有C_1‑10烷基的吩噻嗪基或卤素，L”为以下配体：其中，n为1‑10的整数，R₃为H、C_1‑10烷基、CHO、COOH、NH₂、NO₂、CN、OH、SH、C_1‑6烷氧基、C_1‑6烷基氨基、C_1‑6酰胺基、C_1‑6卤代烷基、具有C_1‑10烷基的吩噻嗪基或卤素，R₄为C_1‑10烷基。