| 摘要 |
1. Способ эффективного получения первого полипептидного фрагмента N-концевым цистеиновым остатком и второго полипептидного фрагмента, имеющего модифицированный C-конец, которые подходят для связывания способом NCL, включающим в себя:(1) стадию взаимодействия полипептида, имеющего следующую структуру:(N-концевой) второй полипептидный фрагмент-Cys-W-(His)n-Z-Met-первыйполипептидный фрагмент (C-концевой),где n представляет собой целое число от 0 до 10, Cys означает цистеин, W означает любые 1, 2 или 3 аминокислоты, Z означает любые 0, 1 или 2 аминокислоты, His означает гистидин, Met означает метионин, и N-концевым аминокислотным остатком первого полипептидного фрагмента является цистеинс CNBr для получения следующих полипептидных фрагментов:(A) первого полипептидного фрагмента с N-концевым цистеиновым остатком и(B) третьего полипептидного фрагмента, имеющего следующую структуру:(N-концевой) второй полипептидный фрагмент-Cys-W-(His)n-Z-Met′ (C-концевой), где Met′ означает производное Met;(2) стадию взаимодействия упомянутого третьего полипептидного фрагмента с соединением, представленным следующей формулой (I):Химическая формула 1где является атомом серы или кислорода, иRи Rявляются удаляемыми группамиа в дальнейшем взаимодействия в органическом растворителе с соединением, представленным формулой (II):Химическая формула 2в которойY является атомом кислорода, атомом серы или =NH, аRявляется атомом водорода, ацильной группой или алкоксикарбонильной группойдля получения второго полипептидного фрагмента с модифицированным С-концом, имеющего следующую структуру:(N-концевой) второй полипептидный фрагмент-C(=O)-NH-C(=Y)NHR(C-концевой).2. Способ получения по п. 1, вк� |
