一种基于量子点的甲胎蛋白免疫层析试纸条的制备方法

摘要

本发明涉及一种基于量子点的甲胎蛋白免疫层析试纸条的制备方法；将量子点(quantum dots QDs)与甲胎蛋白抗体偶联制备成荧光探针QDs@Ab1，QDs@Ab1、甲胎蛋白(alpha fetoprotein AFP)和包埋在试纸条的另一种甲胎蛋白抗体(Ab1’)通过抗体抗原之间的作用，形成一种类似夹心的结构QDs@Ab1-AFP-Ab1’，定性半定量地检测原发性肝癌的肿瘤标志物AFP。与现有产品和技术相比，整个制备过程简单，适合于产业化生产；抗原浓度与探针荧光强度正相关，可定性定量检测甲胎蛋白；检测过程成本低廉且操作非常简便，适合高危人群的社区肿瘤筛选，建立了一种肿瘤检测的新方法。

主权项

基于量子点的甲胎蛋白免疫层析试纸条的制备方法；其特征是步骤如下：(1)将水溶性量子点与1‑(3‑二甲氨基丙基)‑3‑乙基碳二亚胺盐酸盐加入到反应器，然后向反应器中加入PBS缓冲液，在旋转混合架上活化量子点的羧基30min，离心得到活化的量子点；(2)将活化的量子点、甲胎蛋白单克隆抗体按照摩尔比为1:20～100比例混合于PBS缓冲液中，将混合溶液置于旋转混合架上，室温下反应2～3小时；(3)反应结束后，采用离心分离进行纯化，用PBS缓冲液清洗除去游离的抗体和1‑(3‑二甲氨基丙基)‑3‑乙基碳二亚胺盐酸盐，得到荧光探针QDs@Ab1，然后将产物分散在含有1～5％牛血清白蛋白的PBS缓冲液中，4℃静置过夜；(4)将另一种甲胎蛋白抗体以及羊抗鼠IgG用PBS缓冲液稀释到1～2mg/mL，用点样仪喷于硝酸纤维素膜上以形成T线和C线；(5)将样品垫，结合垫、硝酸纤维素膜、吸水垫按顺序固定于单面塑胶板上，各个垫和膜之间相互重叠1～3mm，完成试纸条的组装。