用于适配子筛选的DNA双链分离方法以及适配子筛选方法和新的适配子

摘要

本发明涉及生物领域，公开了一种用于适配子筛选的DNA双链分离方法以及适配子筛选方法和新的适配子；所述分离方法包括：1)取FITC-ssDNA亚文库溶液用酸进行中和；2)进行高分辨率琼脂糖电泳；3)分离ssDNA亚文库及其中的污染序列，切取ssDNA亚文库的目标条带，通过小分子量DNA纯化回收试剂盒进行回收，即得；所述适配子筛选方法还包括：1-1)准备随机ssDNA文库及引物；1-2)孵育筛选；1-3)扩增；1-4)取dsDNA与固定有链亲合素的磁珠进行孵育，然后加入碱性溶液即得；本发明新的适配子具有如SEQ ID NO.1或SEQNO.2所示的核苷酸序列。本发明提高了DNA双链分离效率，降低链亲合素及Biotin-ssDNA对ssDNA亚文库的污染，改善了筛选孵育过程中的细胞生存状态，提高cell-SELEX的成功率。

主权项

一种用于核酸适配子筛选中DNA双链的分离方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：1)取由生物素‑链亲合素‑磁珠法及碱变性法获得的FITC‑ssDNA亚文库溶液用酸进行中和；2)将步骤1)所得中和后溶液进行高分辨率琼脂糖电泳；3)分离ssDNA亚文库及其中的污染序列，切取ssDNA亚文库的目标条带，通过小分子量DNA纯化回收试剂盒进行回收，即得。