用高效切向流过滤进行蛋白质分级的方法

摘要

本发明提供用于把感兴趣分子从包含其的混合物中分离出来的方法和装置，其包括将高效切向流过滤(HPTFF)的改进方法用于该混合物，本发明的HPTFF用于澄清和处理不同的进料流，以根据感兴趣分子的大小和电荷移出感兴趣分子。根据一个优选的实施方案，转基因乳进料流被稳定化，并除去颗粒物例如脂肪、酪蛋白微粒和细菌。在本发明中使用的HPTFF法利用优化的工艺参数，包括温度、跨膜压、分子电荷、分子大小、错流速度和乳浓度。也开发了清洗和保存方法，以确保长的膜使用寿命。也开发了无菌过滤步骤以除去残留在澄清的转基因乳进料流中的任何细菌。

主权项

1.一种从进料流中分离感兴趣蛋白质的方法，包括：(a)通过高效切向流过滤工艺过滤所述进料流，该工艺基于所述感兴趣蛋白质的孔径和电荷从所述进料流中分离所述感兴趣分子，同时保持通量在通量对TMP曲线的压力依赖区中转变点通量的约5到100％范围的水平，其中沿膜的方向保持跨膜压力基本恒定在不大于过滤的转变点的跨膜压力的水平，从而所述感兴趣蛋白质从所述进料流中被选择性分离，使得所述感兴趣蛋白质保持其生物活性；(b)通过超滤工艺过滤所述进料流；和其中所述过滤发生在所述感兴趣蛋白质的转变点通量以上；其中所述分子具有1到1000kDa之间的分子量。