发明名称 酶水解蛋白质的方法
摘要 本发明是一种酶水解蛋白质的方法。工艺步骤为将待水解的蛋白质进行清洗、除杂,再将蛋白质进行酶水解。酶水解时以外源酶中性蛋白酶或碱性蛋白酶或中性蛋白酶与碱性蛋白酶而成的混合复合蛋白酶为水解酶,以缓冲溶液控制酶水解反应体系中的pH值,以蚯蚓或粮食为待水解的蛋白质,将计量好的蛋白质、水解酶、缓冲溶液加入反应容器,反应温度为20℃~75℃之间,反应时间至少为2小时,即得含有氨基酸、小分子肽、核苷酸、甘油、脂肪酸等为主要成分的多种物质组成的高活性酶解液。该方法工艺简单、可操作性强,而且反应条件温和,水解产物中的氨基酸不被破坏,酶解液的生物活性高;并可重复利用外源酶和未反应完全的蚓体蛋白和粮食,经济成本低。
申请公布号 CN100535121C 申请公布日期 2009.09.02
申请号 CN200410081498.5 申请日期 2004.12.16
申请人 四川师范大学;遂宁市兴宇生态农艺有限公司 发明人 赵仕林;杨丽雪;王锡宇;廖洋
分类号 C12P21/00(2006.01)I 主分类号 C12P21/00(2006.01)I
代理机构 成都科海专利事务有限责任公司 代理人 严礼华
主权项 1.一种酶水解蛋白质的方法,其特征在于工艺步骤如下:(1)清洗、除杂以蚯蚓为酶水解的蛋白质,以克或千克计量,以外源酶中性蛋白酶与碱性蛋白酶混合而成的复合蛋白酶为水解酶,以克或千克计量,以缓冲溶液为酶水解体系中pH值的控制溶液,以毫升或升计量,用清水清洗待酶水解的蛋白质、并去除杂质、均匀破碎;(2)酶水解蛋白质酶水解蛋白质时水解酶与蛋白质、缓冲溶液的配比分别为:水解酶的质量(g)∶蛋白质的质量(g)=1∶(1000~10);水解酶的质量(g)∶缓冲溶液的体积(ml)=1∶(100000~1000);所述酶水解体系中控制其pH值的缓冲溶液为磷酸或硼酸-硼砂或硼砂-氢氧化钠,pH值控制在1~12之间;所述酶水解体系中水解酶的加酶量控制在6000U/g~600000U/g之间,其蛋白质的质量控制在1.0%~1.5%之间;所述中性蛋白酶与碱性蛋白酶混合而成的复合蛋白酶中,中性蛋白酶和碱性蛋白酶的质量比分别为:中性蛋白酶占复合蛋白酶总量的0.1%~85%,碱性蛋白酶也占复合蛋白酶总量的0.1%~85%,其两者之和为100%;将计量好的蛋白质放入反应容器,然后加入计量好的水解酶和缓冲溶液进行混合,振荡、加热使其在反应容器中起生化反应,反应温度在20℃~75℃之间;反应时间至少为2小时,即得高活性蛋白质酶解液。
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