嗜热厌氧纤维素产氢菌的分离方法

摘要

嗜热厌氧纤维素产氢菌的分离方法，它涉及一种产氢菌的分离方法。它解决了现有产氢菌的培养方法存在结晶度低、较难降解及培养出的产氢菌产氢率低的问题。分离方法：一、制备菌悬液A；二、制备富集后菌悬液；三、将富集后菌悬液倍比稀释后进行滚管，培养至管中有透明圈出现；四、制备菌悬液B；五、将菌悬液B倍比稀释后进行滚管，培养至管中有透明圈出现，然后挑取透明圈菌落再次培养；六、重复步骤三到步骤五5次，即可分离。本发明分离嗜热厌氧纤维素产氢菌的方法具有结晶度高，容易降解及分离出产氢菌的产氢率约为现有产氢菌产氢率的6～8倍的优点。

主权项

1、嗜热厌氧纤维素产氢菌的分离方法，其特征在于嗜热厌氧纤维素产氢菌的分离方法按以下步骤实现：一、将4.0～6.0g采集样品放入装有数颗玻璃球的250mL灭菌血清瓶中，然后加入80～120mL灭菌水，通入氮气后封口，而后以100～200r/min的振速振荡4～6h，得菌悬液A；二、取4～6mL菌悬液A转入装有100mL纤维素粉固体培养基的250mL灭菌血清瓶中，然后在60±2℃的条件下恒温培养5～7天，得富集后菌悬液；三、取1mL富集后菌悬液然后用无菌厌氧水倍比稀释，然后分别取104倍、105倍和106倍的稀释液1mL与融化的纤维素粉固体培养基混合均匀后进行滚管，而后在60±2℃的条件下恒温培养至管中有透明圈出现；四、挑取透明圈菌落放在纤维素粉液体培养基上，然后在80～90℃的条件下水浴处理8～12min，然后在60±2℃的条件下恒温培养至培养液混浊，得菌悬液B；五、取1mL菌悬液B然后用无菌厌氧水倍比稀释，然后分别取104倍、105倍和106倍的稀释液1mL与融化的纤维素粉固体培养基混合均匀后进行滚管，而后在60±2℃的条件下恒温培养至管中有透明圈出现，然后再挑取透明圈菌落放在纤维素粉液体培养基上培养；六、重复步骤三到步骤五5次，即可分离出嗜热厌氧纤维素产氢菌。