沙门菌和大肠杆菌O78双重Tem-PCR快速检测方法

摘要

本发明公开了沙门菌和大肠杆菌O78双重Tem-PCR快速检测方法。该方法使用沙门菌的invA基因引物组和大肠杆菌O78的O-抗原基因引物组对复杂样品增菌后提取的混合DNA直接进行双重Tem-PCR扩增，通过凝胶电泳判读结果。本发明采用Tem-PCR技术和多重PCR技术相结合，克服多重PCR的扩增偏爱性问题，比普通多重PCR检测灵敏度提高了2-3个数量级，可以达到样品污染菌为个位数的检测水平，解决了传统的多重PCR技术容易导致假阴性结果的问题。本发明能快速、方便、特异、灵敏地检测沙门氏菌和大肠杆菌O78，易于大范围推广，可用于细菌鉴定、疾病诊断和流行病学调查，具有广阔的市场前景和较大的经济效益。

主权项

用于沙门菌和大肠杆菌O78双重Tem‑PCR快速检测的引物，其特征在于，包括：(1)具有SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8所示的核苷酸序列；或(2)与(1)的核苷酸序列具有基本序列同源性，并具有相同功能的核苷酸序列。