一种双基因microRNA荧光定量内参及其引物在贝类组织样品中的应用

摘要

本发明涉及分子生物学领域，具体地说是一种双基因microRNA（miRNA）荧光定量内参及其引物在贝类组织样品中的应用。本发明选取的两个基因（let-7和miR-87）是经过严格的内参筛选程序选出的，是贝类miRNA中在不同组织中表达最稳定的miRNA基因，其在组织中的表达稳定性优于常用的miRNA内参基因snRNA U6，snRNA U1和5.8S RNA。随机选取2个miRNA，以该双基因miRNA作为内参，在组织样品中进行荧光定量分析，得出的表达结果与miRNA测序表达谱高度吻合，证明了该双基因内参的可靠性和稳定性。

主权项

一种双基因microRNA荧光定量内参及其引物在贝类组织样品microRNA荧光定量分析中的应用，其特征在于：双基因microRNA荧光定量内参中的两个贝类基因为let‑7和miR‑87，其中let‑7为序列表SEQ ID No:1中碱基序列，miR‑87为序列表SEQ ID No:2中碱基序列，所述贝类为长牡蛎；所用内参基因let‑7的特异性引物为：5’‑GGGTGAGGTAGTAGGTTGTATAGTT‑3’；miR‑87的特异性引物为：5’‑GGTGAGCAAAGTTTCAGGTGTGT‑3’。