美沙酮半抗原及其制备方法、美沙酮抗原和美沙酮单克隆抗体及其应用

摘要

本发明公开了一种美沙酮半抗原及其制备方法、抗原和单克隆抗体及其应用，所述美沙酮半抗原具有式Ⅰ结构，所述制备方法是将美沙酮还原为羟基美沙酮，与丁二酸酐进行酯化反应制得的；所述美沙酮完全抗原是将美沙酮半抗原与蛋白质载体连接制得的；所述美沙酮单克隆抗体是先将美沙酮完全抗原施用于动物进行免疫，再用杂交瘤技术或重组DNA方法制得的；所得的美沙酮单克隆抗体在制备检测样品中美沙酮的试剂、试剂条或试剂盒中的应用。本发明的完全抗原具有高免疫原性，且保留了美沙酮的免疫反应性；美沙酮单克隆抗体的特异性优越且效价高；胶体金标记美沙酮单抗免疫试纸条灵敏度高、特异性强、简便快捷，可进行现场检测等优点。式Ⅰ。

主权项

一种美沙酮免疫试纸条，其特征在于，所述试纸条包括测试条和支撑测试条的支撑板；所述测试条由滤样纸、层析材料、硝酸纤维素膜和吸水纸依次搭接组成，所述层析材料预包被胶体金标记的美沙酮单克隆抗体，所述硝酸纤维素膜上吸附检测线和质控线；所述的检测线为完全抗原美沙酮‑BSA；所述的质控线为羊抗鼠IgG多克隆抗体；所述层析材料上预包被胶体金标记的美沙酮单克隆抗体是采用浓度为0.5mg/ml胶体金标记的美沙酮单克隆抗体溶液进行预包被的，包被量为50μ1/cm²；所述硝酸纤维膜上吸附的完全抗原美沙酮‑BSA是采用浓度为0.5mg/ml的完全抗原美沙酮‑BSA溶液进行吸附的，吸附量为10μ1/cm²；所述硝酸纤维膜上吸附的羊抗鼠IgG多抗是采用浓度为0.8mg/ml羊抗鼠1gG多抗溶液进行吸附的，吸附量为10μ1/cm²；所述单克隆抗体是先将美沙酮半抗原与蛋白质载体连接制得美沙酮完全抗原，后将美沙酮完全抗原施用于动物进行免疫，再用杂交瘤技术或重组DNA方法制得的；所述蛋白质载体为牛血清白蛋白；所述美沙酮半抗原具有下述式Ⅰ结构，制备方法包括如下步骤：(1)将美沙酮还原为羟基美沙酮；(2)将步骤(1)所得的羟基美沙酮与丁二酸酐进行酯化反应，即得；所述酯化反应为：先将羟基美沙酮溶于甲苯，再加入丁二酸酐进行反应；所述酯化反应的温度为50‑150℃，时间为6‑24h；