高速逆流色谱分离制备高纯度DHA方法

摘要

本发明公开了高速逆流色谱分离制备高纯度DHA方法。本发明提供了一种提取DHA的方法，包括如下步骤：1）将微藻油在氢氧化钾–甲醇溶液中进行皂化处理，得到皂化处理后溶液；2）将所述皂化处理后溶液进行高速逆流色谱分离，得到二十二碳六烯酸；所述微藻油为从微藻细胞中提取的油脂。本发明的实验证明，本发明首次利用高速逆流色谱技术从微藻油中分离纯化得到高纯度的DHA，其工艺更加简单、操作方便、样品无损失、高效快速、制备量大及纯度高，是一种适合大量制备生产高纯度不饱和脂肪酸的良好方法。

主权项

一种提取二十二碳六烯酸的方法，包括如下步骤：1)将微藻油进行皂化处理，得到皂化处理后溶液；2)将所述皂化处理后溶液进行高速逆流色谱分离，得到二十二碳六烯酸；所述微藻油为从微藻细胞中提取的油脂；所述微藻为裂壶藻Schizochytrium sp.；步骤2)中，所述高速逆流色谱采用的溶剂为正庚烷‑乙腈‑乙酸‑甲醇混合液；所述正庚烷‑乙腈‑乙酸‑甲醇混合液为将正庚烷、乙腈、乙酸和甲醇按照体积比为4:5:1:1混合得到；所述高速逆流色谱的转速为850‑900rpm；所述高速逆流色谱的溶剂的流速为2‑3mL/min；所述高速逆流色谱的溶剂的下相为流动相，溶剂的上相为固定相。