| 摘要 |
Sposób selektywnego wychwytywania DNA zawierającego niesparowane zasady przez białko MutS immobilizowane w fazie stałej w małych objętościach roztworu, polega na tym, że białko MutS jest immobilizowane w fazie stałej, a DNA jest nanoszone do środowiska reakcyjnego w buforze, zapewniającym wybiórcze wiązanie fragmentów DNA zawierających niesparowane zasady w obecności fragmentów DNA w pełni komplementarnych. Sposób efektywnego odzyskania DNA wychwyconego przez immobilizowane w fazie stałej białko MutS polega na tym, że fragmenty DNA związane przez białko MutS immobilizowane w fazie stałej są efektywnie eluowane w sposób, który umożliwia ich bezpośrednią identyfikację za pomocą metody PCR. Sposób kolorymetrycznego oznaczenia biotynylowanego DNA wychwyconego przez białko MutS, polega na tym, że białko MutS zaopatrzone w domenę umożliwiającą jego skuteczną immobilizację na podłożu stałym wychwytuje fragmenty biotynylowanego DNA, a jego obecność jest wykrywana dzięki sygnałowi powstającemu w efekcie hydrolizy substratu enzymatycznej domeny reporterowej sprzężonej z awidyną. |
