一种多聚体荧光蛋白复合物及其应用

摘要

本发明公开了一种多聚体荧光蛋白复合物及其应用。该多聚体荧光蛋白复合物，由多聚体荧光蛋白和目的蛋白连接而成；所述多聚体荧光蛋白由若干个荧光蛋白单体组成；所述目的蛋白是能够与靶标蛋白相互作用的蛋白。蛋白复合物保留了单区抗体的抗原识别特异性，并能染色表达该抗原的细胞。单区抗体和DsRed能在体外被耦合连接，连接产物在没有其他标记试剂的情况下，能直接用于一步染色，在FACS及其他领域有较强的应用价值。

主权项

一种制备多聚体荧光蛋白复合物的方法，为如下（1）或（2）：（1）包括如下步骤：Ⅰ、制备A片段，A片段为N端连接有2‑7个甘氨酸的、可形成多聚体的荧光蛋白单体；Ⅱ、制备B片段，B片段为C端连接有转肽酶的识别序列的、具有识别功能的蛋白；Ⅲ、使A片段和B片段在转肽酶的作用下进行连接，得到所述荧光蛋白单体与所述具有识别功能的蛋白的复合物；所述荧光蛋白单体与具有识别功能的蛋白的复合物为如下中的至少一种：由所述荧光蛋白单体组成的多聚体，该多聚体中有1个、2个、……、n个荧光蛋白单体均分别与一个所述具有识别功能的蛋白形成融合蛋白；所述n小于等于构成所述多聚体的荧光蛋白单体的数目；（2）包括如下步骤：Ⅰ、制备A片段，A片段为C端连接有转肽酶的识别序列的、可形成多聚体的荧光蛋白单体；Ⅱ、制备B片段，B片段为N端连接有2‑7个甘氨酸的、具有识别功能的蛋白；Ⅲ、使A片段和B片段在转肽酶的作用下进行连接，得到所述荧光蛋白单体与所述具有识别功能的蛋白的复合物；所述荧光蛋白单体与具有识别功能的蛋白的复合物为如下中的至少一种：由所述荧光蛋白单体组成的多聚体，该多聚体中有1个、2个、……、n个荧光蛋白单体均分别与一个所述具有识别功能的蛋白形成融合蛋白；所述n小于等于构成所述多聚体的荧光蛋白单体的数目。