发明名称 一种金环蛇抗菌肽Cath-BF30的高效制备方法
摘要 本发明公开了一种金环蛇抗菌肽Cath-BF30的高效制备方法,步骤如下:设计并合成Cath-BF30基因,其序列为SEQ ID NO.1;利用<i>Xho</i><i></i>I与<i>Xba</i> I双酶切,将合成的基因片段克隆入pGAPZα载体,得重组表达质粒pGAPZα-Cath-BF30;将重组表达质粒转化毕赤酵母细胞,获得工程菌SMD-pGAPZα-30;工程菌在pH低于5的条件下进行发酵;发酵上清经0.45μm滤膜过滤除杂后,采用SP Sepharose FF柱进行分离纯化。该方法可实现高效分泌表达,并保证分泌产物具有天然N端序列,分泌表达产物具有抑制痤疮杆菌的活性,而且发酵上清只需一步离子交换即可获得高纯度Cath-BF30。
申请公布号 CN104830891A 申请公布日期 2015.08.12
申请号 CN201510126984.2 申请日期 2015.03.23
申请人 广东药学院 发明人 李黄金;赵林;郝思怡
分类号 C12N15/81(2006.01)I;C12N15/12(2006.01)I;C07K14/46(2006.01)I;C07K1/18(2006.01)I;C12R1/84(2006.01)N 主分类号 C12N15/81(2006.01)I
代理机构 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 代理人 任重
主权项 一种金环蛇抗菌肽Cath‑BF30的高效制备方法,其特征在于,首先设计Cath‑BF30基因序列如SEQ ID NO.1所示,再利用表达载体构建重组工程菌,工程菌在pH低于5的条件下进行发酵后,经强阳离子SP Sepharose FF柱进行分离纯化,得到金环蛇抗菌肽Cath‑BF30。
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