人外周血循环DNA的引物序列及定量检测试剂盒

摘要

本发明涉及人外周血循环DNA的引物序列及定量检测试剂盒，所述引物序列为一组用于扩增Alu的特异性引物，所述的一组包括五对引物。所述引物序列的配套标准品为含Alu保守基因序列的纯化质粒，标准品经过基因工程技术将Alu目的基因序列连接到质粒上，通过鉴定、扩增、提取和纯化获得，并通过260nm进行吸光度读取，进行浓度计算分析获得的DNA准确的拷贝数目，并通过稀释制备成不同浓度的标准品。本发明是一种基于定量核酸扩增的分子生物学方法，实时定量多聚酶链反应，通过使用特异性的引物扩增人外周血中循环DNA的保守基因Alu的不同片段，通过检测释放的荧光信号对人外周血中循环DNA进行定量检测。

主权项

人外周血循环DNA的引物序列，其特征是，所述引物序列为一组用于扩增Alu的特异性引物，分别针对Alu保守序列的不同长度片段；所述的一组包括五对引物分别是：第一对上游引物Alu1‑F：5’‑aga cca tcc tgg cta aca cg‑3’，第一对下游引物Alu1‑R：5’‑aga cgg agt ctc gct ctg tc‑3’；第二对上游引物Alu2‑F：5’‑cta aca cgg tga aac ccc g‑3’，第二对下游引物Alu2‑R：5’‑cgc cca ggc tgg agt g‑3’；第三对上游引物Alu3‑F：5’‑gtg aaa ccc cgt ctc tac taa aaa‑3’，第三对下游引物Alu3‑R：5’‑gag tgc agt ggc gcg at‑3’；第四对上游引物Alu4‑F：5’‑tac aaa aaa tta gcc ggg cg‑3’，第四对下游引物Alu4‑R：5’‑gat ctc ggc tca ctg caa g‑3’；第五对上游引物Alu5‑F：5’‑aaa att agc cgg gcg tg‑3’，第五对下游引物Alu5‑R：5’‑gtt cac gcc att ctc ctg c‑3’。