用于高水平生产二十碳五烯酸的改善的优化的解脂耶氏酵母菌株

摘要

本发明描述了含油酵母解脂耶氏酵母的工程化的菌株，所述菌株能够生产包含按总脂肪酸的重量百分比计的[“％TFA”]高于50重量％的二十碳五烯酸[“EPA”](一种ω-3多不饱和脂肪酸)，并且具有至少3.1的EPA％TFA对亚油酸比值(以％TFA测量)的油。这些菌株除其他异源的Δ9延伸酶、Δ8去饱和酶、Δ5去饱和酶、Δ17去饱和酶、Δ12去饱和酶、C_16/18延伸酶外，还过表达至少一种Δ9延伸酶/Δ8去饱和酶复合酶，并任选地过表达二酰基甘油胆碱磷酸转移酶、丙二酰-辅酶A合成酶和/或酰基-辅酶A溶血磷脂酰基转移酶。至少一种过氧化物酶体生物合成因子蛋白的表达被下调。主张了在所述宿主细胞中生产EPA的方法、从所述细胞获得的油、和由此生产的产品。

主权项

生产油的重组耶氏酵母属（Yarrowia sp）宿主细胞，所述油包含：(a)    按总脂肪酸的重量百分比计至少50%的二十碳五烯酸；并且，(b)    按总脂肪酸的重量百分比计的二十碳五烯酸与按总脂肪酸的重量百分比计的亚油酸的比值为至少3.1，其中所述耶氏酵母属宿主细胞包含：(i)     至少一种由SEQ ID NO:13组成的复合酶；(ii)    表达被下调的过氧化物酶体生物合成因子蛋白3；(iii)   至少一种重组构建体，所述构建体包含至少一种核苷酸序列，其编码由SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:17、SEQ ID NO:25、SEQ ID NO:29、SEQ ID NO:31或SEQ ID NO:32组成的酰基‑辅酶A溶血磷脂酰基转移酶，和(iv)   至少一种重组构建体，所述构建体包含至少一种核苷酸序列，其编码由SEQ ID NO:42组成的丙二酰‑辅酶A合成酶。