生产异源多聚体蛋白质

摘要

本申请描述用于高效生产能够特异性结合多个靶标的抗体和其它多聚体蛋白质复合物(在本文中统称为异源多聚体蛋白质)的方法。所述靶标可以是例如单个分子上的不同表位或位于不同分子上。该方法将异源多聚体蛋白质的高效高基因表达水平、正确组装和易于纯化组合在一起。本发明还提供使用这些异源多聚体蛋白质的方法，和包含这些抗体的组合物、套盒和制品。

主权项

制备异源多聚体蛋白质的方法，所述异源多聚体蛋白质包含具有第一异源二聚化区域的第一含铰链的多肽、和具有第二异源二聚化区域的第二含铰链的多肽，其中第二异源二聚化区域与第一异源二聚化区域相互作用，且其中第一和第二含铰链的多肽在铰链区之间通过至少一个链间二硫键连接，所述方法包括步骤：(a)培养包含编码第一含铰链的多肽的第一核酸的第一宿主细胞，其中在表达该含铰链的多肽的条件下进行该培养；(b)培养包含编码第二含铰链的多肽的核酸的第二宿主细胞，其中在表达该含铰链的多肽的条件下进行该培养；和(c)破坏第一和第二宿主细胞的细胞膜，以从所述宿主细胞中释放第一和第二含铰链的多肽，形成异源多聚体蛋白质，其中第一和第二宿主细胞已在单个悬浮液中组合在一起；其中异源多聚体蛋白质是双特异性抗体或多特异性抗体，且第一和第二含铰链的每一多肽是抗体重链，且与抗体轻链配对以形成第一对和第二对，并且其中第一对和第二对的轻链包含不同的可变区序列。