一种蛋白亲和纯化IgY的方法

摘要

本发明具体涉及一种蛋白亲和纯化IgY的方法，其包括以下步骤：1蛋白M的基因克隆；2构建表达载体，通过表达载体对蛋白M进行可溶性表达、纯化可溶性蛋白M；3将纯化后的可溶性蛋白M与NHS活化的琼脂糖凝胶4FF进行偶联，制作亲和纯化介质；4将IgY抗体初级产物通过蛋白M琼脂糖凝胶柱进行亲和纯化，获得高纯度IgY，IgY抗体初级产物为等质量的卵黄液与蒸馏水的混合物；5将纯化后洗脱所得IgY抗体溶液在PBS溶液中4℃过夜透析，PBS溶液的pH为7.0～7.4；6收集透析袋内液体即为高纯度的IgY抗体。本发明具有以下有益效果：1、工序简单；2、IgY纯化效率高达95％；3、更加环保、绿色、健康。

主权项

一种蛋白亲和纯化IgY的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)、蛋白M的基因克隆；(2)、构建表达载体，通过表达载体对蛋白M进行可溶性表达、纯化可溶性蛋白M；(3)、将步骤(2)纯化后的可溶性蛋白M与NHS活化的琼脂糖凝胶4FF按照质量比1：(1～3)进行偶联，制作亲和纯化介质；(4)、将IgY抗体初级产物通过蛋白M琼脂糖凝胶柱进行亲和纯化，获得高纯度IgY，IgY抗体初级产物为等质量的卵黄液与蒸馏水的混合物；(5)、将纯化后洗脱所得IgY抗体溶液在PBS溶液中4℃过夜透析，PBS溶液的pH为7.0～7.4；(6)、收集透析袋内液体即为高纯度的IgY抗体。