田鼠巴贝虫Bm7重组抗原蛋白及其制备方法和用途

摘要

本发明公开了一种田鼠巴贝虫Bm7重组抗原蛋白，具有SEQ ID NO.2所示氨基酸序列的蛋白、或由该蛋白发生一个或多个氨基酸的置换、缺失或插入而形成的具有相同功能的蛋白。此外，本发明还公开了该田鼠巴贝虫Bm7重组抗原蛋白的制备方法，包括田鼠巴贝虫Bm7基因序列的扩增、田鼠巴贝虫Bm7重组质粒的构建和鉴定、重组蛋白的诱导表达和纯化等步骤。此外，本发明还公开了该田鼠巴贝虫Bm7重组抗原蛋白在制备检测田鼠巴贝虫病患者(动物或人)血清抗体的试剂或试剂盒中的应用。经验证，本发明田鼠巴贝虫Bm7重组抗原蛋白用于田鼠巴贝虫病的诊断具有较高的敏感性和特异性，是潜在的诊断候选靶标，可作为田鼠巴贝虫病诊断的目的抗原。

主权项

一种田鼠巴贝虫Bm7重组抗原蛋白，其特征在于，具有SEQ ID NO.2所示氨基酸序列的蛋白、或由该蛋白发生一个或多个氨基酸的置换、缺失或插入而形成的具有相同功能的蛋白；该田鼠巴贝虫Bm7重组抗原蛋白采用如下方法制备：1)田鼠巴贝虫Bm7基因序列的扩增：设计SEQ ID NO:3所示的核苷酸序列或其互补链和SEQ ID NO:4所示的核苷酸序列或其互补链为引物，以含田鼠巴贝虫cDNA为模板进行PCR扩增；所得PCR产物经琼脂糖凝胶电泳，并回收纯化；2)田鼠巴贝虫Bm7重组质粒的构建和鉴定；3)将该重组质粒转化于宿主细胞中，并在宿主细胞中表达，得到表达的重组蛋白；4)PAGE胶蛋白微量回收试剂盒回收纯化表达的重组蛋白。