磁性分子印迹聚合物-荧光分析方法

摘要

磁性分子印迹聚合物-荧光分析方法，本发明涉及农药的快速检测。本发明要解决现有快速检测方法中小分子天然抗体难以制备的问题。方法：一、制备包覆聚乙二醇及油酸的磁性纳米粒子；二、制备三嗪类农药磁性分子印迹聚合物；三、采用荧光分光光度计测定荧光信号。本发明用磁性分子印迹仿生材料，替代了一般快速检测方法中常用但难以制备的天然抗体，借助农药分子与荧光探针对磁性印迹的竞争结合，从技术上实现了三嗪类小分子农药的非免疫法快速检测。本发明用于快速检测三嗪类农药残留。

主权项

磁性分子印迹聚合物‑荧光分析方法，其特征在于该方法具体是按照以下步骤进行的：一、将FeCl₃·6H₂O和FeSO₄·7H₂O溶解在100mL去离子水中，在氮气保护条件下，水浴加热至温度为60℃～70℃，加入碱溶液至生成黑色沉淀，在搅拌条件下保持20min～40min，再加入聚乙二醇和油酸，得到修饰后的磁性纳米粒子；其中，FeCl₃·6H₂O的质量为2.7g，FeSO₄·7H₂O的质量1.7g，碱溶液的浓度为的1.0mol/L，聚乙二醇的质量为1g，油酸的体积为2mL；二、将1mmol扑灭津、4mmol甲基丙烯酸、2mL溶剂和30mL致孔剂混合，超声处理30min，在避光条件下控制温度为4℃，保持10h～12h，再向体系中加入2mL交联剂和0.2g步骤一得到的修饰后的磁性纳米粒子，混合均匀，通氮气15min，然后加入30mg引发剂，密封，控制水浴温度为60℃、转速为200rpm，振荡12h，再采用外加磁场对进行磁吸附分离，将分离出的沉淀物质冷却至室温，采用洗脱液进行反复洗涤，至高效液相色谱/质谱检测不到上清液中有模板分子残留后，再分离出沉淀物，在真空干燥条件下，烘干，得到三嗪类农药磁性分子印迹聚合物；三、将10mg步骤二得到的三嗪类农药磁性分子印迹聚合物加入0.5mL 5‑(4,6‑二氯三嗪基)氨基荧光素乙醇溶液中，再与0.25mL三嗪类农药阿特拉津标准品的乙醇溶液混合，在室温条件下振荡孵育1h，再采用磁力架吸附30s，然后吸取100mL上清液，再用3mL乙醇稀释，然后采用荧光分光光度计测定荧光信号，控制激发波长为336nm，并于515nm的检测荧光发射波长，完成磁性分子印迹聚合物‑荧光分析方法；步骤二中溶剂为乙睛；步骤二中致孔剂为氯仿；步骤二中交联剂为三羟甲基丙烷三甲基丙烯酸酯；步骤二中引发剂为偶氮二异丁腈。