用于转染原生质体的改进技术

摘要

本发明涉及用于向植物细胞原生质体中引入一种或多种感兴趣的分子的方法，所述方法通过提供植物细胞原生质体，采用能够改变选自错配修复系统和非同源性末端连接的一种或多种通路的调节的组合物和/或能够引入DSBs的组合物进行植物细胞原生质体的第一转染，采用一种或多种感兴趣的分子如致突变的寡核苷酸进行植物细胞原生质体的第二转染和允许细胞壁形成来实现。

主权项

用于向植物细胞原生质体中引入一种或多种感兴趣的分子的方法，其包含如下步骤：‑通过酶降解和/或从植物细胞中移除细胞壁来提供植物细胞原生质体；‑采用下调错配修复系统的第一组合物进行植物细胞原生质体的第一转染，其中第一组合物包含dsRNA；‑采用一种或多种诱变寡核苷酸进行植物细胞原生质体的第二转染；‑允许细胞壁形成；其中第二转染在第一转染之后进行，且其中方法进一步包括用抑制或阻止细胞壁形成或再形成的非酶组合物‑在第一转染之前或与其同时，或‑介于第一和第二转染之间，或‑在第二转染之前或与其同时，接触植物细胞原生质体。