快速检测微量磺胺氯哒嗪的试纸条及制备方法

摘要

本发明涉及一种快速检测磺胺氯哒嗪的试纸条及其制备方法，底层为支撑层，中间层为吸附层，保护层固定在吸附层上，吸附层从测试端依次为吸附纤维层、金标抗体纤维层、纤维素膜层及吸水材料层，在纤维素膜层上设有偶联磺胺氯哒嗪的载体蛋白溶液印制的检测印迹，用羊抗或兔抗小鼠IgG或羊抗兔IgG抗体溶液印制的对照印迹，金标抗体为胶体金标记的磺胺氯哒嗪抗体。本发明的试纸条特异性强，灵敏度高，简便，直观，准确，适用范围广，成本低，操作简便，能满足不同层次人员需要，具有广阔的市场前景，易于推广应用。

主权项

一种快速检测微量磺胺氯哒嗪的试纸条，底层为支撑层，中间层为吸附层，保护层固定在吸附层上，其特征是：吸附层从测试端依次为吸附纤维层、金标抗体纤维层、纤维素膜层及吸水材料层，在纤维素膜层上设有偶联磺胺氯哒嗪的载体蛋白溶液印制的检测印迹，用羊抗或兔抗小鼠IgG或羊抗兔IgG抗体溶液印制的对照印迹，金标抗体为胶体金标记的磺胺氯哒嗪抗体；所述偶联磺胺氯哒嗪的载体蛋白溶液是通过以下方法得到的：称取3.5 mg磺胺氯哒嗪钠置于10 mL螺口瓶中，用2mL 0.2mol/L的盐酸溶解；冰浴冷却后，避光边搅拌、边逐滴加入灭菌双蒸水溶解已预冷的1 mol/L 的NaNO₂溶液，NaNO₂溶液的用量以用淀粉碘化钾试纸检验呈蓝黑色为宜，4℃反应6h，得重氮化的磺胺氯哒嗪钠；称取10mg载体蛋白溶于1 mL pH 7.2的PBS缓冲液中，预冷后边搅拌边逐滴加入重氮化的磺胺氯哒嗪钠，用1 mol/L的 NaOH调节pH 至8‑9，4℃过夜反应；反应产物在4℃搅拌下用PBS透析3天，每天换液3次，透析后得到纯化的偶联磺胺氯哒嗪的载体蛋白溶液，冻干，‑20℃保存，备用。