一种含有藻类的水中“两虫”的富集、纯化方法及其含量测定方法

摘要

本发明公开了一种含有藻类的水中“两虫”的富集、纯化方法及其含量的测定方法。本发明的富集、纯化方法包括首先对含藻水进行加压处理，沉淀去除藻类，再对上清液进行混合醋酸纤维滤膜过滤，丙酮溶解富集产物，离心后获得含有“两虫”的富集沉淀物，接着向沉淀中加入磷酸盐-吐温缓冲溶液制成“两虫”悬浮液，然后进行密度梯度离心处理得到“两虫”纯化液，最后将“两虫”通过过滤附着在醋酸纤维膜上，染色处理后进行荧光显微镜检测，计数。本发明方法对含藻水样中“两虫”的浓缩和分离纯化方法进行改进，减小了镜检时背景杂质的干扰，检测方法的回收率高，检测结果准确，符合美国国家环保局制定的用于测定水中“两虫”的质量控制标准。

主权项

一种含有藻类的水中隐孢子虫和贾第鞭毛虫的富集、纯化方法，包括如下顺序进行的步骤：1）加压处理对含有藻类的水进行加压处理，然后静置放置，获得上清液；2）浓缩、富集处理首先，采用醋酸纤维滤膜对上清液进行过滤；接着将过滤后醋酸纤维滤膜和滤膜截留物加入到丙酮中，溶解、分散，获得丙酮溶解‑分散混合物；然后对丙酮溶解‑分散混合物进行离心处理，收集沉淀，获得“两虫”富集沉淀；3）分离、纯化处理向“两虫”富集沉淀中加入磷酸盐‑吐温缓冲溶液，混匀，制成“两虫”悬浮液，接着向悬浮液中加入Percoll‑蔗糖介质，进行密度梯度离心处理，离心混合液分为3层，取中间层，即得纯化的隐孢子虫和贾第鞭毛虫。