一种利用重组大肠杆菌发酵生产顺式-3-L-羟脯氨酸的方法

摘要

本发明属于基因工程领域，公开了一种利用发酵法，直接用微生物或酶对原料L-脯氨酸进行羟基化处理，生产顺式-3-L-羟脯氨酸的方法。其中，能进行羟基化处理的微生物是含有顺式-3-L-脯氨酸羟化酶活性的重组大肠杆菌，羟基化反应是在2-酮戊二酸和亚铁离子存在下，催化游离的L-脯氨酸为顺式-3-羟基-L-脯氨酸。本发明公开了所述大肠杆菌在生产顺式-3-L-羟脯氨酸中的应用，摇瓶发酵结果表明，本发明的重组大肠杆菌发酵生产顺式-3-L-的产量达到0.5g/L，表明该重组菌具有良好的工业开发前景。

主权项

一株产顺式‑3‑L‑羟脯氨酸的重组微生物的构建方法，其特征在于，优化并合成一种高效启动子和脯氨酸‑3‑羟化酶结构基因P3H，并将此高效启动子和结构基因P3H连接到质粒上，构建的重组质粒可大量表达脯氨酸‑3‑羟化酶，将此重组质粒转化到宿主微生物中，得到产顺式‑3‑L‑羟脯氨酸的重组微生物。