一种伤科接骨外用制剂的检测方法

摘要

本发明公开了一种伤科接骨外用制剂的检测方法。所述伤科接骨外用制剂是由十二味药材制备而成，用乙醇提取并浓缩成清膏，然后，该清膏、冰片、朱砂以及药学上可接受的辅料相混合。本发明是采用现代先进提取浓缩技术生产而成，有效的保留了药材中的活性物质和药材的有效成分，大大提高了生药成分的溶出度，同时提高了生物利用度，有效提高了治疗效果。同时，克服了现有技术的不足，直接透皮吸收，起效迅速，稳定性良好，便于使用、携带和保存；本发明的工艺简单易行，原料及辅料来源稳定，易于产业化。

主权项

一种伤科接骨的外用制剂的检测方法，这里，所述的外用制剂是由下述重量配比的药材制备的：其中，以上十二味药材，除冰片、马钱子粉外，朱砂水飞成极细粉，其余药材粉碎成粗粉，与马钱子粉混合，用乙醇提取并浓缩成清膏，然后，将该清膏、冰片、朱砂与药学上可接受的辅料制备成外用制剂；这里，所述外用制剂为凝胶剂；所述的检测方法，包括如下项目：性状、鉴别、检查和含量测定：性状  内容物为红色胶状半固体，气微腥；鉴别(1)取本品，置显微镜下观察：不规则颗粒细小，暗棕红色，有光泽，边缘暗黑色；(2)取本品约10g，加95％乙醇50ml，超声处理30分钟，放冷，滤过，溶液蒸干，残渣加水10ml微热使溶解，转移至分液漏斗中，加水饱和正丁醇提取3次，每次10ml，合并正丁醇提取液，再用正丁醇饱和的水洗涤3次，每次5ml，水液弃去；取正丁醇液，水浴蒸干，残渣加甲醇1ml溶解，作为供试品溶液；另取三七对照药材0.5g，按供试品溶液制备方法制备，作为对照药材溶液；照中国药典2010年版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10μl，对照品溶液10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以13：7：2的氯仿‑甲醇‑水10℃以下放置12小时的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸无水乙醇溶液，在105℃加 热至斑点显色清晰，置日光下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色斑点；(3)取本品约10g，加乙醚50ml，密塞，超声处理15min，滤过，乙醚液50℃水浴挥散至近干，残渣加醋酸乙酯1ml溶解，作为供试品溶液；另取冰片对照药材，加醋酸乙酯制成每1ml含10mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2010年版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10μl与对照品溶液5μl,分别点于同一硅胶G薄层板上，以9：1的60～90℃石油醚‑丙酮为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1％香草醛浓硫酸溶液；在105℃加热至斑点显色清晰；置日光下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色斑点；(4)取本品约10g，加乙醇50ml，密塞，超声处理20分钟，放冷，滤过，溶液蒸干；残渣加3％ml/ml硫酸溶液10ml溶解，转移至分液漏斗中，以浓氨试液调pH9‑10，加三氯甲烷提取2次，每次20ml；合并三氯甲烷液，水浴挥去三氯甲烷，残渣加三氯甲烷1ml溶解，作为供试品溶液；另取士的宁对照品、马钱子碱对照品，加三氯甲烷制成每1ml各含0.5mg的混合溶液，作为对照品溶液；照中国药典2010年版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10μl与对照品溶液5μl,分别点于同一硅胶G薄层板上，以3：6：0.6:0.4的甲苯‑丙酮‑乙醇‑浓氨试液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液；置日光下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色斑点；【检查】重金属及有害元素  照中国药典2010年版一部附录IX B电感耦合等离子体质谱法的铅、镉、砷、汞、铜测定法测定，汞不得过百分之一点五，铅不得过百万分之十；镉不得过百万分之五；砷不得过百万分之五；铜不得过百万分之二十；pH值  取本品10g，加10倍水溶解，照中国药典2010年版一部附录VII G的pH值测定法操作，本品pH应在6.5‑7.5之间；粒度  取本品适量，置于载玻片上，涂成薄层，覆以盖玻片，共涂3 片，照中国药典2010年版一部附录XI B第一法的粒度测定法测定，均不得检出大于180μm的粒子；其他  本品应符合中国药典2010年版一部附录I Q的凝胶剂项下有关的各项规定；【含量测定】（1）马钱子粉  照中国药典2010年版一部附录VI D的高效液相色谱法测定；色谱条件:以十八烷基硅烷键合硅胶为填料，柱温室温，以21：79的乙腈‑0.01mol/L庚烷磺酸钠与0.02mol/L的磷酸二氢钾等量混合溶液为流动相，检测波长为254nm，理论塔板数按士的宁色谱峰计算，不得低于5000；这里，所述0.01mol/L庚烷磺酸钠与0.02mol/L的磷酸二氢钾等量混合溶液用10％磷酸调节pH值2.8；对照品溶液制备取士的宁对照品适量，精密称定，加甲醇溶解，制成每1ml含0.004mg的溶液；供试品溶液制备取本品约2g，精密称定，置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇50ml，密塞，称定重量，功率250w、频率40KHz的超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，充分振摇，滤过，取续滤液5ml，经0.45μm的微孔滤膜滤过，滤液作为供试品溶液；测定法分别精密吸取供试品溶液与对照品溶液各10μl，注入液相色谱仪中，测定，即得；（2）三七  照中国药典2010年版一部附录VI D的高效液相色谱法测定；色谱条件:以十八烷基硅烷键合硅胶为填料，柱温室温，以21：79的乙腈‑水为流动相，检测波长为203nm，理论塔板数按人参皂苷Rg₁色谱峰计算，不得低于10000；对照品溶液制备取人参皂苷Rg₁对照品适量，精密称定，加甲醇溶解，制成每1ml含0.1mg的溶液；供试品溶液制备取本品约2g，精密称定，置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇50ml，密塞，称定重量，功率250w、频率40KHz超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，充分振摇，滤过，取续滤液5ml，经0.45μm微孔滤膜滤过，滤液作为供试品溶液；测定法分别精密吸取供试品溶液与对照品溶液各10μl，注入液相色谱仪中，测定，即得；（3）朱砂取本品约5g，精密称定，置250ml锥形瓶中，加硫酸40ml，硝酸钾6g，加热微沸30分钟，使成无色透明溶液，放冷，加水50ml，滴加1％高锰酸钾溶液至显粉红色以2min内不消失为度，再滴2％硫酸亚铁溶液至红色消失，用0.05mol/L硫氰酸铵滴定液滴定；每1mL硫氰酸铵滴定液相当于5.815mg硫化汞。